N-glycan profielsing is noodsaaklik vir die produksie van biowegweringsmiddele. Yaohai Bio-Pharma bied N-glycan profielsing dienste aan deur Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) van vrygemaakte en gemerkte glykane te gebruik. Die algemene stappe vir die voorbereiding van N-glykan monsters sluit in die vertering van die glikoproteïen (GP), ontglikosilering, purifikasie, merking/derivatisering, en Solid Phase Extraction (SPE).
Ons het betrokke gewees by die Proteïenstruktur Karakterisering van verskeie groot molekulêre stowwe, insluitend Rekombinante Subeenheid Vakseen, Nanoliggame/VHHs/En-domein Antibodies (sdAbs), Antibode Fragment, Hormone/Peptide, Sitokine, Groei Faktore (GF), Ensimme, Kollagene, ens.
Reguleringsvereistes vir N-Glycan Profielsing
Volgens die ICH Q6B riglyne, word 'die koolhydraatinhoud (neutrale suikers, aminosuikers en sialiese suur) vir glykoproteïene bepaal. Daarbenewens word die struktuur van die koolhydraatkette, die oligosakharidepatroon (antennaprofiel) en die glikosileringstas(sies) van die polipeptideketting geanaliseer tot moontlike omvang.
Analitiese Metode
| Analise |
Metodes |
| N-glykan Profilerings |
Vloeistofkromatografie-Massaspectrometrie (LC-MS) analise van vrygestelde en gemerkte glikane |
Prosedures
1. Enzimatiese glikaanvrylating met Peptide N-Glikosidase F (PNGase F)
2. Derivatisering van vrygestelde glikane deur 2-aminoanisamide (2-AB)
3. Purifikasie van die oesbare N-glikane op 'n TSK Amide - 80 kolom as groot hoeveelhede wasmiddels, nie-volatiele sale of materiale met vrye amino-groepe teenwoordig is
4. Markering deur fluoresente 2-aminoanisamide (2-AB)
5. LC-MS analise van gemerkte N-glikane
6. Die Bybel Data-analise
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
