Die Betekenis van die Ontwikkeling van die Naverwerkingsproses (DSP)
Die hele fermantasiebroue bevat doelwitproteïne of plasmids, sowel as produk- en prosesverwante verontreinigings, bv. aggreagate, mikrobiële selsubstrate, Gasheersele Proteïene (HCP), Gasheersele DNS (HCD), endotoxine en antibiotika.
Dus is dit krities om 'n doeltreffende DSP-ontsmettingsproses te ontwerp om sekere verontreinigings te verwyder en hoogs verreinigde en hoë-kwaliteit geneesmiddelstowwe te produseer. Boonop kan die optimering van die ontsmettingsproses help om produkherwinning te verhoog, koste te verminder en prosesvergroting en -herhaalbaarheid te verbeter.
Sleutelwoorde: prosesontwikkeling, optimalisering en validasie, reinigingsproses, kromatografie, verontreiniging, HCP-verwydering, HCD-verwydering, endotoxine-verwydering, proteïne-denaturering en heropvouing, VLP-assamblee, konjugsie
Toepassing: Bioweglike industrie, menslike geneesmiddels, dieregeneesmiddels, vakseen, rekombinante grootmolekulêre biologiese, rekombinante biologiese, biologiese reagensies
DSP Oplossings van Yaohai Bio-Pharma
Ons het wydlopende ervaring om teikenproteïne of plasmids uit komplekse matrise te isoler deur die ontwikkeling en optimalisering van naverwerkingstoevoerprosesse. Daar is verskillende tipes eenheidsoperasies wat geskik is vir die reiniging van biologiese stowwe, insluitend sentrifugering, filtrering, homogenisasie, alkaliese lysing, ultrafiltrering, sedimentasie, proteïne-denaturering en heropvouing, kromatografie, ens.
Ons beskikbare reinigingsontwikkelingsdiensinsluit:
- Ontwikkeling van die volledige reinigingsproses vanaf sel- of supranant-opsameling tot die finale aktiewe bestanddeel.
- Optimalisering van die reinigingsproses gebaseer op produk- en prosesverwante onreinighede om produk kwaliteit en veiligheid te verhoog, bv. HCP, HCD, endotoxine.
- Definisie en optimalisering van sleutelparameters in een of meer eenheidsoperasies, insluitend sellysing, tangensiële vloeifiltrasie, resinskerming, chromatografie, proteïnedenaturalisering en heropvouing, ens.
- Optimalisering van die proses ten opsigte van kwaliteit, opbrengs, herwinning, koste en skaalbaarheid.
- Validasie van die navoringsproses van die reinigingsproses.
- Risikogebaseerde parameterbereikassessering en Ontwerp van Eksperimente (DoE) in prosesmodellering.
Diensbesonderhede
Gestandaardiseerde proteïne- of plasmidreinigingsplatforms is gebaseer op meerdere grove reinigingsstappe en minder as 4 chromatografiestappe, insluitend vang, tussenuitreiniging en polishing.
| Diensbesonderhede |
Eenhede Operasies |
Parameters |
| Grof Reiniging |
Sentrifugering |
Rotasiesnelheid, Tyd |
| Hoogdruk Homogenisasie |
Totale Vaste Inhoud, Druk, Siklusse |
| Kontinue Alkalin Lisering |
Verhouding van Hersusperde Selles tot Liseringoplossing, Liseringtyd |
| Tangensiale Vloei Filtrering |
Membraanmateriaal en Porgrootte, Voedervlooi Tempo Transmembranedruk (TMP), Filtraatvolume tot membranaanduidingsverhouding |
| Afsetting |
Afsettingsmedium Tipe en Konentrasie, Additief, pH, Temperatuur, Tyd |
| Denaturalisering en Heropvouing |
Oplosbaarheid van inklusie liggaam proteïne |
Denaturantekonsentrasie (bv., Urea, Guanidine HCl, Sterk Ioniese Detergeens), Detergente (bv., Sodium dodecyl sulfate, SDS), Reduserende Agents (bv., Dithiothreitol, DTT), Chelateerders (Ethylenediaminetetraakseekuur, EDTA), Temperatuur, Tyd |
| Proteïen heropvouing |
Heropvouingsmetodes (verduuning, dialise of SEC-heropvouing), Proteïnekonsentrasies, Buffers, pH, Temperatuur, Tyd, Oksiderende en Reduserende Agents (bv., Glutathione, GSH/ Oksideerde Glutathione, GSSH, DTT/GSSH, Cysteïen/Cystien), Klein Molekuul Toevoegings (L-arginien, Urea, Guanidine/HCl, en Detergente) |
| Vang, Tussenverfynings, en Polishing |
AC (Affiniteitskromatografie) |
Verskeie tipes kromatografieresin/kolom (bv., AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Kolomlengte en -deursnee, Buffer samestelling, Injeksievolume, Mobile Fase Samestelling (Adsorpsie en Desorpsie), pH, Vloeiwyse, Bind-, Was- en Eluasievoorwaardes. |
| IEX (Anion of Kationwisselkromatografie) |
| HIC (Hidrofoob Interaksie kromatografie) |
| Desalting en/of grootte-uitsluitingskromatografie (SEC) |
| RPC (Omgewende Fase Kromatografie) |
| MMC, Gemengde modus kromatografie |
Gevallestudie
Geval 1
Ons word belas om die navoringsproses van die volgende te ontwikkel en optimeer om die proteïenreinheid van 85% na 90% te verhoog terwyl ons die kromatografie-stappe verminder.
Yaohai het 'n robuuste en skaalbare reinigingsproses met 3 stappe van kromatografie vir die doelwitproteïen, 'n bakteriële allergie, gelever. En die finale reinheid het 95% bereik.
Geval 2
Yaohai is deur ons klient aangestel om die proses van endotoxienverwydering vir die virusagtige partikel (VLP) vaccine te optimaliseer.
Ons span het die kromatografieparameter-optimalisering uitgevoer en 'n middelstof met 'n reinheid van 98% en 'n endotoxienresidu van 12.8EU/mg voorberei.
Ons ervaring
- Ons het betrokke geweest by die ontwikkeling en vervaardiging van verskeie groot molekulê, insluitend rekombinante subeenheidvaksine, VLP's, hormone (insulien, GLP-1, groeihormoon), sitokiene (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), groei faktore (EGF, FGF, NGF), nanoliggame/een-domeinliggame (sdAbs), ensieme, ens.
Toerusting
Ons maak gebruik van bedryfsnaamvoerende AKTA Pure, AKTA Avant, en Preparatiewe HPLC-stelsels vir die uitvoering van verskeie kromatografie-metodes, insluitend affiniteit, ionruiling, hidrofobo interaksie, omgekeerde fase, en grootte-uitsluitingskromatografie.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
