De deamidatie van glutamine- en asparagine-zydeketenes is 'n algemene modifikasie wat die eienskappe van proteïenbiowegware beïnvloed. Deamidatie kan plaasvind in glutamine-residus, maar gewoonlik teen 'n veel lagere tempo. Die deamidatiespoed word beïnvloed deur temperatuur, pH, plaaslike proteïenstruktur en flankaaminoasresidus.
Yaohai BioPharma bied 'n aminoas-deamidatietoetsingsdiens aan, wat u in staat stel om aminoas-deamidatie deur vloeikromatografie-massaspectrometrie (LC-MS) te opspoor.
Ons het ons betrokke by die eiwitstruktuurkarakterisering van verskeie groot molekulê, insluitend Herstelde Subeenheidvaksine, Nanoliggame/VHH's/Enkel-domeinantistowe (sdAbs), Antistoffragment, Hormone/Peptide, Sitokine, Groeifaktore (CF), Ensimme, Kollagene, ens.
Reguleringsvereistes vir Aminoas Deamidatie
Volgens die ICH Q6B riglyne kan deamidate vorms opgespoor en gekenmerk word deur kromatografiese, elektrofoetiese en/of ander toepaslike analitiese metodes.
Analitiese Metodes
Analise |
Metodes |
Deamidasie |
Vloeistofkromatografie-Massaspectrometrie (LC-MS) |
Prosedures
bv., aspartaatdeamidasie
1. Enzimatiese vertering
2. LC-MS onder die Hoë-Werkings-Vloeistofkromatografie (HPLC) toestande
3. Data-analise
Asparagine-deamidasie berm plaas deur 'n succinimide-intermediêre (Suc), wat vatbaar is vir rasemisasie en hidrolise, wat vier Asp-isomere produseer, insluitend L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp, en D-IsoAsp.
In teorie kan Gln-deamidasie vier ooreenstemmende Glu-isomere genereer deur 'n proses soortgelyk aan Asn-deamidasie.
Die hoë resoluerende massa-spektrometrie identifiseer maklik die 1-Da massa-verskil tussen Asn/Gln-bevatte peptiede en hul ooreenstemmende deamidaseerde teenoorgestelde Asp/Glu.