Tầm quan trọng của kỹ thuật căng thẳng
Kỹ thuật căng thẳng nhằm mục đích tạo ra vật chủ biểu hiện có các đặc điểm mong đợi, cần thiết cho sự phát triển CMC sinh học và xác định chất lượng cũng như tính nhất quán của sản phẩm và quy trình sản xuất.
Từ khóa: kỹ thuật sàng lọc và di truyền chủng, xây dựng chủng biểu hiện protein, kỹ thuật tế bào vi sinh vật, kỹ thuật chủng vi khuẩn, kỹ thuật chủng nấm men, xây dựng vi sinh vật nhân sơ, kỹ thuật vi sinh vật nhân chuẩn, chủng kỹ thuật
Ứng dụng: y học cho người, thú y, vắc xin, sinh học tổng hợp, sinh học phân tử lớn tái tổ hợp, thuốc thử sinh học
Dịch vụ Kỹ thuật Căng thẳng của Yaohai Bio-Pharma
Hưởng lợi từ hơn 10 năm kinh nghiệm CDMO trong lĩnh vực sinh học vi sinh vật, chúng tôi đã tích lũy được kinh nghiệm phong phú về kỹ thuật và lựa chọn các loại vectơ plasmid và vật chủ vi sinh vật (vi khuẩn, nấm men). Chúng tôi có thể tìm thấy hệ thống biểu hiện tốt nhất cho sinh học độc đáo của bạn.
Chúng tôi đã thu thập các vật chủ vi sinh vật khác nhau với nguồn rõ ràng và CoA tiêu chuẩn, bao gồm
Vi khuẩn: Escherichia coli (E. coli)
Men: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Chi tiết dịch vụ
DỊCH VỤ
|
Chi tiết dịch vụ
|
Dòng thời gian tối thiểu/ngày
|
Phân phôi
|
Kỹ thuật căng thẳng
|
Loại bỏ gen hoặc xóa gen
|
TBD
|
Báo cáo kỹ thuật căng thẳng
|
Nhập gen hoặc chèn gen
|
Xây dựng căng thẳng (E. coli)
|
Chuyển đổi plasmid (đa vật chủ)
|
5
|
COA của máy chủ thương mại,
Báo cáo xây dựng căng thẳng
|
Xác minh PCR
|
thanh lọc chủng
|
Bảo quản chủng
|
Xây dựng chủng (Nấm men)
|
Chuẩn bị tế bào nấm men có khả năng
|
10
|
Tuyến tính hóa plasmid
|
Biến đổi điện
|
Sàng lọc kháng thuốc/thiếu dinh dưỡng
|
thanh lọc chủng
|
Bảo quản chủng
|
Sàng lọc máy chủ phù hợp
|
Trích xuất DNA plasmid hoặc bộ gen
|
15-20
|
Quá trình sàng lọc máy chủ,
Báo cáo thử nghiệm các chủng được thiết kế
|
Xác minh PCR, tiêu hóa enzyme hạn chế
|
Giải trình tự gen mục tiêu
|
Sàng lọc các máy chủ biểu hiện cao
|
Sàng lọc vật chủ có tính ổn định di truyền
|
Bảo quản chủng
|
trường hợp nghiên cứu
Hansenula polymorpha được thiết kế đã cải thiện năng suất biểu hiện HPV L1 VLP.
Chúng tôi đã thành lập men Hansenula đa hình (H. đa hình) nền tảng kỹ thuật và sàng lọc để biểu hiện protein/peptide tái tổ hợp. Đầu tiên, chúng tôi tạo ra H. đa hình các chủng thiếu hụt protease bằng cách xóa gen mục tiêu. Thứ hai, một vector mang gen HPV L1 đã được biến nạp vào gen có khả năng H. đa hình tế bào. Cuối cùng, chúng tôi sàng lọc dòng vô tính tốt nhất từ hàng trăm lựa chọn, có tính ổn định về mặt di truyền và đặc tính năng suất cao.
Các tính năng dịch vụ của chúng tôi
Chúng tôi đã chứng minh được kiến thức chuyên môn về các vật chủ vi sinh vật khác nhau, ví dụ: Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) chủng SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) và Hansenula đa hình (H. đa hình).
Chúng tôi có kinh nghiệm với E. coli bài tiết ngoại chất, biểu hiện cơ thể hòa tan và hòa tan, cũng như biểu hiện nội bào hoặc bài tiết của nấm men.
Chúng tôi không thêm thuốc kháng sinh hoặc thêm thuốc kháng sinh theo hướng dẫn quy định.
Chúng tôi thiết lập một nền tảng sàng lọc thông lượng cao để sàng lọc các chủng ổn định và năng suất cao từ hơn một trăm chủng ứng cử viên.
Chúng tôi đảm bảo rằng quy trình sàng lọc và kỹ thuật chủng loại có thể truy nguyên được, theo Quản lý hồ sơ và dữ liệu tốt.