Ý Nghĩa Của Kỹ Thuật Chủng Loại
Kỹ thuật chủng loại nhằm tạo ra hệ thống biểu hiện có đặc điểm mong muốn, điều này là cần thiết cho việc phát triển CMC của sinh phẩm và quyết định đến chất lượng cũng như tính nhất quán của sản phẩm và quy trình sản xuất.
Từ khóa: kỹ thuật di truyền chủng loại và sàng lọc, xây dựng chủng biểu hiện protein, kỹ thuật tế bào vi sinh vật, kỹ thuật chủng vi khuẩn, kỹ thuật chủng nấm men, xây dựng vi sinh vật nguyên nhân, kỹ thuật vi sinh vật nhân quả, chủng đã được chỉnh sửa
Ứng dụng: thuốc cho người, thuốc thú y, vắc-xin, sinh học tổng hợp, sinh phẩm phân tử tái tổ hợp, sinh phẩm thí nghiệm
Dịch vụ Kỹ thuật Chủng Loại của Yaohai Bio-Pharma
Lợi dụng từ hơn 10 năm kinh nghiệm CDMO trong sinh học vi sinh, chúng tôi đã tích lũy được nhiều kinh nghiệm phong phú trong việc thiết kế và chọn lọc các loại vectơ plasmid khác nhau, cũng như các chủ vi sinh (vi khuẩn, nấm men). Chúng tôi có thể tìm ra hệ thống biểu hiện tốt nhất cho sinh phẩm độc đáo của bạn.
Chúng tôi đã thu thập nhiều loại vi sinh vật khác nhau với nguồn gốc rõ ràng và CoA tiêu chuẩn, bao gồm
Vi khuẩn: Escherichia coli (E. coli)
Men: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Chi Tiết Dịch Vụ
Dịch Vụ
|
Chi Tiết Dịch Vụ
|
Thời gian tối thiểu\/ngày
|
Các kết quả đạt được
|
Kỹ Thuật Khuẩn Giống
|
Loại gen, hoặc Xóa gen
|
Bệnh tbd
|
Báo cáo kỹ thuật biến đổi chủng
|
Chèn gen, hoặc Nhập gen
|
Xây dựng chủng ( E. coli )
|
Chuyển plasmid (nhiều loài chủ)
|
5
|
COA của các vật chủ thương mại,
Báo cáo xây dựng chủng
|
Xác minh PCR
|
Tinh khiết hóa chủng
|
Bảo quản chủng
|
Xây dựng chủng (Men)
|
Chuẩn bị tế bào men có năng lực
|
10
|
Phân mảnh plasmid
|
Điện chuyển
|
Sàng lọc kháng thuốc / Thiếu hụt dinh dưỡng
|
Tinh khiết hóa chủng
|
Bảo quản chủng
|
Màn hình chủ phù hợp
|
Chiết xuất DNA plasmid hoặc Genome
|
15-20
|
Quy trình sàng lọc chủ nhà,
Báo cáo kiểm tra của chủng đã được thiết kế gene
|
Xác minh PCR, tiêu hóa enzyme hạn chế
|
Phân tích trình tự gen mục tiêu
|
Lọc các chủ thể có biểu hiện cao
|
Lọc các chủ thể có sự ổn định di truyền
|
Bảo quản chủng
|
Nghiên cứu trường hợp
Hansenula polymorpha được cải tiến đã tăng cường sản lượng biểu hiện VLP HPV L1.
Chúng tôi đã thiết lập nấm men Hansenula polymorpha (H. polymorpha) nền tảng kỹ thuật và lọc cho việc biểu hiện protein/peptide tái tổ hợp. Trước tiên, chúng tôi đã tạo ra H. polymorpha các chủng thiếu enzym protease bằng cách xóa gen có đích. Thứ hai, vector mang gen HPV L1 đã được chuyển vào tế bào H. polymorpha tế bào. Cuối cùng, chúng tôi chọn clone tốt nhất từ hàng trăm tùy chọn, với đặc tính ổn định di truyền và khả năng sản xuất cao.

Đặc điểm Dịch vụ của Chúng tôi
Chúng tôi đã chứng minh chuyên môn trong nhiều loại chủ vi sinh khác nhau, ví dụ như, Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) và Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
Chúng tôi có kinh nghiệm với E. coli việc tiết ra ngoài màng tế bào, biểu hiện tan được và khối protein không tan cũng như biểu hiện trong tế bào nấm men hoặc tiết ra ngoài.
Chúng tôi không thêm kháng sinh hoặc chỉ thêm kháng sinh theo hướng dẫn của quy định.
Chúng tôi thiết lập một nền tảng sàng lọc thông lượng cao để chọn lọc các chủng có năng suất cao và ổn định từ hơn một trăm chủng ứng cử.
Chúng tôi đảm bảo rằng quá trình kỹ thuật chỉnh sửa chủng và sàng lọc là có thể truy xuất, tuân thủ theo Quy tắc Quản lý Dữ liệu và Hồ sơ Tốt.