Việc phân tích N-glycan là rất cần thiết cho việc sản xuất dược phẩm sinh học. Yaohai Bio-Pharma cung cấp dịch vụ phân tích N-glycan sử dụng Kromatografi Lỏng-Chiếc Quang Phổ Khối (LC-MS) của các glycan được giải phóng và đánh dấu. Các bước chuẩn bị mẫu N-glycan bao gồm tiêu hóa protein glyco (GP), loại đường, tinh chế, đánh dấu/đạo hóa, và chiết xuất pha rắn (SPE).
Chúng tôi đã tham gia vào việc Đặc trưng hóa Cấu trúc Protein của nhiều phân tử lớn khác nhau, bao gồm Vắc xin Tái tổ hợp, Nanobodies/VHHs/ Antibody đơn miền (sdAbs), Phân đoạn Antibody, Hormone/Peptide, Cytokine, Yếu tố Tăng trưởng (GF), Enzyme, Collagen, v.v.
Yêu cầu Quản lý đối với Phân tích N-Glycan
Theo hướng dẫn ICH Q6B, “đối với glycoprotein, hàm lượng carbohydrat (đường trung tính, đường amin và axit sialic) được xác định. Ngoài ra, cấu trúc của chuỗi carbohydrat, mẫu oligosaccharide (hồ sơ antennary), và vị trí glycosyl hóa của chuỗi polypeptide được phân tích ở mức độ có thể.
Phương pháp Phân tích
| Phân tích |
Phương pháp |
| Phân tích N-glycan |
Phân tích Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) của glycans được giải phóng và đánh dấu |
Quy trình
1. Giải phóng glycan enzym bằng Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. Phản ứng hóa học của glycans được giải phóng bằng 2-aminobenzamide (2-AB)
3. Tinh chế N-glycans thu được trên cột TSK Amide - 80 nếu có lượng lớn chất tẩy rửa, muối không bay hơi, hoặc vật liệu có nhóm amin tự do
4. Đánh dấu bằng 2-aminobenzamide (2-AB) huỳnh quang
5. Phân tích LC-MS của N-glycans đã được đánh dấu
6. Phân tích dữ liệu
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
