Čarobna P. pastoris: Oblikovanje proizvodnje rekombinantnih beljakovin

Genetsko inženirski proteini, ki so proteini, izraženi v gostinskih celicah s pomočjo tehnik genetskega inženiringa, najdeni širok obseg uporabe v biomedicinskih raziskavah, terapiji in diagnostiki. Izbor ustreznega sistema za izraz je ključni dejavnik za uspešno izražanje genetsko inženirskih proteinov.

Yaohai Bio-Pharma si pravi več kot desetletje izkušenj s gradnjo knjižnice kvasinskih števil in z proizvodnjo. V tem članku bo Yaohai podrobneje obravnaval podrobnosti o sistemu izražanja Pichia pastoris (P. pastoris) za genetsko inženirski protein.

P. pastoris kot sistem za izražanje genetsko inženirskih proteinov

P. pastoris, kot metilotropska kvasenica, je sposobna učinkovito uporabljati C1 spojine, kot je metanol, kar jo dela idealnim domačinom za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin. Postopek vključuje vpeljavo vektorja, ki nosi ciljno DNS, v kvasenico, s čimer izkoristimo eukariotske celinske lastnosti kvasenice za izražanje rekombinantne beljakovine. Sistem heterologe gene izražanja, ki uporablja P. pastoris kot domačina, se je v zadnjih letih hitro razvil in je priznan kot pomemben in široko sprejet orodje v molekularni biologiji za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin.

Strategija za P. pastoris izrazni sistem

Optimizacijske strategije za P. pastoris fermentacijske procese

Za povečanje učinkovitosti fermentacijskih procesov je ključno integrirati manipulacije z cepi in sprejeti različne strategije med fermentacijo P. pastoris. Kljub temu, da obstajajo pogosto uporabljene pogoji za fermentacijo P. pastoris, optimalni pogoji so visoko odvisni od želenega produkta, uporabljenega genetskega sestava in ali je regulacija produkta dosežena prek konstitutivnega ali induciranega promotorja. Ključni dejavniki za uspešno izboljšavo, optimizacijo in simulacijo v P. pastoris vključujejo prilagoditev parametrov fermentacije, izbiro načinov delovanja ter uporabo matematičnih modelov. Optimizacija fermentacijskega procesa vsebuje natančno izbiro parametrov, kot so temperatura, pH, sestav sredstva in disolveni kiseklik, ter sprejemanje primerenih načinov delovanja, kot so neprekinjena in fed-batch fermentacija. Nadalje lahko uporabimo metabolne modele na ravni genomov in matematične metode za izboljšanje optimizacije fermentacijskega procesa.

Zaključek

V primerjavi z bakterijami ima P. pastoris, kot eukariotski organizem, v procesu fermiranja edinstvene prednosti. Zato je P. pastoris priznan kot glavna mikrobiološka platforma za proizvodnjo rekombinantnih beljakovin. Za dosego visoke količine želenega beljanca je nujno optimiziranje procesa.

Učinkovito in hitro razvoj banke celic je ključen za postopek izida produkta. Če potrebujete P. pastoris ali drugo konstrukcijo kvasinskih štrank, lahko Yaohai ponudi obsežno izkušnjo pri gradnji banke mikrobioloških celic, strokovne regulativne usmeritve ter enočasne storitve CDMO. Oblikovali smo razumen razvojni načrt, ki minimizira CMC razvojni cikel rekombinantnih bioloških izdelkov hkrati pa izogiba tveganjem.

Prav tako aktivno iščemo globalne partnerje, institucije ali posameznike. Ponujamo največje naknadne plačilo v industriji. Če imate katere koli vprašanja, nas prosimo, da nas svobodno kontaktirate: [email protected]