Plazmid: majhna krožna molekula DNK z velikim potencialom

Plazmidi, majhne krožne molekule DNK, služijo kot bistveni vektorji za rekombinacijo DNK v raziskavah molekularne biologije in genski terapiji. Izkoristek in kakovost plazmidov sta ključnega pomena, pri čemer sta superzvit delež in vsebnost endotoksina dva pomembna dejavnika, ki vplivata na kakovost plazmidov.

Podtipi plazmidov

Plazmidi, ekstrahirani iz Escherichie coli (E. coli), obstajajo v različnih podtipih: superzvitih (SC), odprtih krožnih (OC) in linearnih (L) oblikah (slika 1). Med njimi superzvite plazmide izkazujejo odlično stabilnost, antigenost ter visoko transfekcijsko in ekspresijsko učinkovitost.

Slika 1. Shematski diagram običajnih podtipov plazmidov

Pri elektroforezi plazmidne DNA v agaroznem gelu je vrstni red migracijske hitrosti superzvita DNA, linearna DNA in odprta krožna DNA (slika 2).

Slika 2. Vzorec migracije različnih podtipov plazmidov z elektroforezo v agaroznem gelu

Yaohai Bio-Pharma je nenehno izboljševala svoje postopke in tehnike, da bi zagotovila, da je superzvit delež plazmidov transfekcijske kakovosti ≥85 % in delež plazmidov raziskovalne kakovosti ≥50 %. Sledi predstavitev primera (slika 3), kjer je elektroforeza v agaroznem gelu kombinirana s programsko opremo Gel-Pro Analyzer za odkrivanje superzvitega deleža.

Slika 3. Rezultati pregleda kakovosti plazmidnega superzvitega deleža

Endotoksin

Endotoksin, sestavni del celične stene po Gramu negativnih bakterij, sestoji predvsem iz lipopolisaharida A (LPS-A) kot strupene komponente. Med ekstrakcijo plazmida se endotoksin sprosti v raztopino za lizo, kar močno vpliva na učinkovitost transfekcije plazmida v celice. Poleg tega lahko aktivira nespecifične imunske odzive v celicah, kar povzroči lažno pozitivne rezultate v poskusih.

Yaohai Bio-Pharma uporablja pristop "brez vnosa" in "visoke odstranitve", pri čemer strogo nadzoruje uporabo reagentov in materialov, ki vsebujejo endotoksin v celotnem procesu čiščenja. Podjetje je razvilo tudi učinkovito metodo odstranjevanja endotoksinov, ki ponuja tri stopnje vsebnosti endotoksinov: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg in ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma ima visoko zmogljivo servisno linijo za ekstrakcijo plazmidov, ki lahko dostavi 1 mg ekstrahiranih plazmidov v enem tednu. Privzeto zagotavlja več kot sedem testov nadzora kakovosti (QC), da zagotovi dostavo visokokakovostnih plazmidov visokega standarda iz več perspektiv.

Aktivno iščemo tudi institucionalne ali individualne globalne partnerje. Ponujamo najbolj konkurenčno nadomestilo v panogi. Če imate kakršna koli vprašanja, nas kontaktirajte: [email protected]