Plazmid: Majhen krožni molekula DNA s velikim potencialom

Plazmid, mali krožni molekuli DNA, služijo kot ključni vektorji za ponovno kombinacijo DNA v raziskavah molekularne biologije in geni terapiji. Rezultat in kakovost plazmidov sta bistvena, pri čemer je delež superzvijenih oblik in vsebina endotoksinov dva pomembna dejavnika, ki vplivata na kakovost plazmidov.

Podtipe plazmidov

Plazmid, izvlečen iz Escherichia coli (E. coli), obstaja v različnih podtipih: superzvijeni (SC), odprti krožni (OC) in linearni (L) obliki (Slika 1). Med njimi kažejo superzvijeni plazmidi odlično stabilnost, antigeničnost in visoko učinkovito transfekcijo ter ekspresijo.

Slika 1. Shemski diagram pogostih podtipov plazmidov

Pri elektroforezi plazmidne DNA v agarosnem gelu je vrstni red hitrosti premikanja superzvijena DNA, linearna DNA in odprta krožna DNA (Slika 2).

Slika 2. Vzorci premikanja pri elektroforzi v agarosnem gelu različnih podtipov plazmidov

Yaohai Bio-Pharma je neprestano izboljševala svoje postopke in tehnike, da bi zagotovila, da je delež superkilenih plazmidov za transfekcijo ≥85%, delež pa tistih za raziskave ≥50%. Spodaj je prikaz primer (Slika 3), kjer je agarovo gelovno elektroforetiko združeno z programskim orodjem Gel-Pro Analyzer za zaznavo deleža superkilenih plazmidov.

Slika 3. Rezultati pregleda kakovosti deleža superkilenih plazmidov

Endotoxin

Endotoxin, sestavina v celinski steni Gram-negativnih bakterij, se glavno sestavlja iz lipopolisacharida A (LPS-A) kot svoje toksične komponente. Med izvlečenjem plazmidov se endotoxin uvoli v lisiranje rešitev, kar močno vpliva na učinkovitost transfekcije plazmidov v celice. Poleg tega lahko aktivira ne-specifične imunsko odzive v celicah, kar vodi do lažnih pozitivnih rezultatov v poskusih.

Yaohai Bio-Pharma uporablja pristop "brez vpeljave" in "visoka odstranitev", strogo nadzoruje uporabo reagentov in snovi, ki vsebujejo endotoksin, skozi celoten proces počiščenja. Podjetje je tudi razvilo učinkovito metodo za odstranitev endotoksina, ponujajoče tri ravni vsebine endotoksina: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg in ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma zlasti zmore visoko-kapaciteten storitveni vir izluščevanja plazmidov, ki lahko dostavi 1 mg izluščenih plazmidov že v enem tednu. Privzeto zagotavlja več kot sedem testov kakovostnega nadzora (QC), da se zagotovi dostava visoke kakovosti in standardnih plazmidov iz več perspektiv.

Prav tako aktivno iščemo globalne partnerje, institucije ali posameznike. Ponujamo največje naknadne plačilo v industriji. Če imate katere koli vprašanja, nas prosimo, da nas svobodno kontaktirate: [email protected]