Predloge plazmidov mRNA: ključni elementi in strategije oblikovanja

Ustvarjanje mRNA za cepiva ali terapije se začne z dobro zasnovano plazmidno šablono. Tukaj je kratek vodnik po ključnih elementih in o tem, kako so optimizirani za uspeh.

Promotor: kje se transkripcija začne

Promotor T7 je najbolj priljubljena izbira za začetek sinteze mRNA. Njegovo klasično zaporedje »TAATACGACTCACTATAGGG« zagotavlja učinkovito prepisovanje. Sčasoma so znanstveniki razvili različice, kot so predloge GG, AG in AT/AU, za delo z naprednimi sistemi omejevanja, kot je CleanCap ali samoojačevalne platforme RNA.

Linearizacija: rezanje plazmida za natančnost

Če želite preprečiti neskončno prepisovanje plazmida, ga je treba prerezati na določenem mestu. Encimi vrste IIS, kot sta BspQⅠ ali BsaⅠ, so popolni za to delo. DNK izrežejo izven svojega prepoznavnega zaporedja, pri čemer za seboj ne puščajo dodatnih bitov in ohranijo ključni rep poliA.

Načrt mRNA: Gradniki uspeha

Zaporedje mRNA vključuje 5' pokrovček, neprevedene regije (UTR), kodirno zaporedje (CDS) in poliA rep. Takole je zasnovan vsak del:

• UTR: Te je mogoče izposoditi iz močno izraženih naravnih genov (kot so tisti v virusih) ali jih oblikovati po meri z uporabo naprednih algoritmov za boljše delovanje.
• CDS: Znanstveniki najprej oblikujejo zaporedje beljakovin, nato optimizirajo kodo DNK za učinkovito izražanje.
• PolyA rep: Odsek 100–120 adeninov ali segmentirana različica, kot je 30A + Linker + 70A, zagotavlja, da mRNA ostane stabilna in funkcionalna.

Z obvladovanjem teh elementov lahko raziskovalci ustvarijo zmogljive predloge mRNA za vse, od cepiv do najsodobnejših terapij. Prihodnost medicine se začne tukaj!

Yaohai Bio-Pharma je platformno podjetje, specializirano za storitve za sisteme izražanja mikrobov. Na podlagi desetletja strokovnega znanja je Yaohai razvil obsežen nabor tehnologij, skladnih z GMP, za sintezo linearne in krožne mRNA, ki ponuja visokokakovostne izdelke RNA, ki vključujejo zasnovo in optimizacijo zaporedja, sintezo genov, in vitro transkripcijo (IVT), cirkularizacijo, čiščenje RNA in inkapsulacijo LNP.

Aktivno iščemo tudi institucionalne ali individualne globalne partnerje. Ponujamo najbolj konkurenčno nadomestilo v panogi. Če imate kakršna koli vprašanja, nas kontaktirajte: [email protected]