Razvoj genske terapije: nova DNK in optimizacija

Na področju uporabe DNA je bila plazmidna DNA (pDNA) vedno zelo priljubljena zaradi svoje izjemne stabilnosti, enostavne proizvodnje, shranjevanja in transporta. Ker pa znanstvene raziskave še naprej napredujejo, se je postopoma pojavila vrsta novih vrst DNK, kot so DNK malega kroga (mcDNA), DNK pasje kosti (dbDNA) in DNK zaprtega konca (ceDNA), ki odpira nove poti za gensko terapijo. in druga vrhunska področja.

mcDNA

mcDNA izhaja iz procesa rekombinacije starševskih plazmidov, pri čemer so bakterijski elementi odstranjeni, medtem ko se ohrani krožna struktura. Postopek njegove priprave temelji na specifičnih encimskih aktivnostih, kot je integraza φC31, s čimer se doseže večja učinkovitost rekombinacije. Pomembna značilnost mcDNA je pomanjkanje bakterijskih sekvenc, kar ji omogoča, da se zanaša na majhne nosilce DNA, s čimer izboljša izražanje genov.

dbDNA

dbDNA ima zaprto dvoverižno konformacijo, ki vsebuje majhne enoverižne zanke na obeh koncih in je popolnoma brez bakterijskih sekvenc in genov za odpornost na antibiotike. Njegova manjša velikost omogoča lažjo dostavo v celice in jedra, hkrati pa izkazuje popolno odpornost na nukleazo. Začetna oblika dbDNA vsebuje le potrebne elemente za izražanje genov, pri čemer izpušča nepotrebne sekvence, zato ima močne zmožnosti genske transfekcije in višje ravni izražanja beljakovin.

ceDNA

ceDNA je zasnovan dvoverižni, linearni, kovalentno zaprt konstrukt DNA, ki vsebuje ciljni gen in druge regulacijske elemente ekspresije. Njegovi konci so obrnjene terminalne ponovitve (ITR), ki zagotavljajo konstruktno zmogljivost na tisoče baz, kar daleč presega meje tradicionalnih vektorjev virusa, povezanega z adeno (AAV). Struktura ITR ceDNA je ključna za vstop v jedro, njen vzorec izražanja pa je skladen z neintegriranimi epizomi. Poleg tega je postopek priprave ceDNA hiter in stroškovno učinkovit, zaradi česar je primeren za raziskave genske terapije na področjih, kot so redke bolezni, cepiva in onkologija.

Optimizacija DNK

Kar zadeva optimizacijo DNA, raziskovalci povečajo izražanje transgenih genov z optimizacijo intrinzičnih komponent plazmidne DNA. Hkrati se zamenjajo izbirni označevalci, kot je zamenjava ampicilina s kanamicinom, da se zmanjšajo avtoimunska tveganja. Poleg tega se selekcijski sistem saharoze uporablja tudi za nadomestitev tradicionalnih selekcijskih markerjev. Kar zadeva optimizacijo kodona, raziskovalci izboljšajo nivoje izražanja proteinov s spreminjanjem uporabe kodona, pri tem pa v celoti upoštevajo gostiteljeve preference glede izražanja zaporedja genov. Med postopkom optimizacije morajo biti raziskovalci pozorni tudi na pristranskost kodona, stabilnost sekundarne strukture mRNA, izogibanje transdelujočim elementom in mestom restrikcijskih encimov ter ravnovesje vsebnosti GC.

Če povzamemo, razvoj novih tipov DNK in optimizacija DNK sta zagotovila nove priložnosti in izzive za področja, kot je genska terapija. Yaohai Bio-Pharma je vzpostavila proizvodne platforme GMP za krožne in linearizirane plazmide. Yaohai lahko zagotovi tudi razvoj procesov in optimizacijo različnih vrst DNK, vključno s temi novimi vrstami DNK, ki izpolnjujejo različne potrebe strank.

Yaohai Bio-Pharma prav tako aktivno išče institucionalne ali individualne globalne partnerje in ponuja najbolj konkurenčno nadomestilo v industriji. Če imate kakršna koli vprašanja, nas kontaktirajte: [email protected]