Циркулярные РНК (circRNA) являются классом однонитевых, ковалентно замкнутых РНК без 5' или 3' концов. Эта уникальная особенность может предотвращать деградацию circRNA экзонуклеазами и обеспечивать высокую стабильность и эффективность трансляции по сравнению с линейной мРНК.
circRNA синтезируется in vitro путем циркуляции из линейного РНК-предшественника. Процесс- или продукт-связанные примеси могут вызвать врожденный иммунный ответ, особенно линейные РНК (РНК-предшественники, поврежденная РНК, удаленные интроны). Критически важно удалить примеси линейной РНК и получить высокие выходы чистой circRNA для исследований in vitro/in vivo и терапевтических применений.
Yaohai Bio-Pharma разработала комплекс технологий синтеза circRNA для предоставления высокоочищенной circRNA, включающей проектирование и оптимизацию последовательности, транскрипцию in vitro (IVT), циклизацию, очистку приготовительной высокоэффективной жидкостной хроматографией (HPLC) и оболочку липидными наночастицами (LNP). Все продукты выпускаются под строгими стандартами контроля качества (QC).
Результаты работы
| Продукт |
Индивидуальная высокоочищенная circRNA |
| Метод синтеза |
Самообрезка группового I интрона |
| Содержание РНК |
100 мкг~10 мг (OD260) |
| Длина |
50~8 000 нуклеотидов |
| Чистота |
A260/A280 |
| Идентификация и чистота |
Агарозное гель-электрофорез (AGE), Высокоэффективная липидная хроматография (HPLC) |
| Буфер |
БезRNаза вода (жидкость) |
| Доставка |
Доставлять с сухим льдом; или при комнатной температуре |
| Хранение |
Жидкость, при или ниже -20°C; Лиофилизированный порошок, при 4°C |
| Применение |
Разработка формулировок ЛНП, клеточные ассайи, эксперименты на животных |
Кейсы
Мы разработали масштабируемый процесс очистки, основанный в основном на подготовительной ХПЛЦ, и получили циркRNA высокой чистоты (＞95%).
Рис. Очистка и анализ циркRNA высокой чистоты (98%)
RU
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
