Продвижение Методов Модификации Репортерной РНК

При выборе того, какой метод модификации репортерного mRNA предпочтительнее, однозначного ответа нет, так как каждый метод и репортерный ген имеют свои преимущества и применимые сценарии. Вот некоторые распространенные методы модификации mRNA и репортерные гены, а также их характеристики и пригодность.

методы модификации mRNA

Метилирование:

1. m6A : Связано со стабильностью mRNA, сплайсингом, трансляцией и обработкой miRNA. Проблемы выявления включают выбор антител и локализацию.
2. 5' Кап Нм : Усиливает стабильность, сплайсинг, полиаденилирование и ядерный экспорт. Помогает различать собственный РНК от чужеродного.
3. Псевдouriлирование : Изменяет кодоны, усиливает стабильность и реагирует на стресс. Катализируется псевдouriл синтазами.

Введение неприродных нуклеотидов:

1. Введено во время транскрипции с использованием стратегии двойной химической модификации. Это повышает стабильность, эффективность и экспрессию белка.

Репортерные гены

1. Ген зелёного флуоресцентного белка (GFP) : Преимущества: Легко обнаружить, стабильные флуоресцентные свойства, нетоксичен для клеток, подходит для имAGING живых клеток. Недостатки: Ограниченная интенсивность флуоресценции.
2. Улучшенный зелёный флуоресцентный белок (eGFP) : Преимущества: Более чем в 6 раз ярче дикого типа GFP, что делает его более подходящим в качестве репортерного гена для изучения экспрессии генов, регуляции, дифференцировки клеток и локализации и транспортировки белков внутри организмов.
3. Красные флуоресцентные белки (например, mCherry) : Преимущества: Более длинные длины волн возбуждения и испускания, что приводит к меньшему фону при внутренней имAGING клеток, отличная флуоресцентная яркость и фотостабильность, а также меньшая клеточная токсичность. Недостатки: Возможно, не так часто используется как GFP в определённых экспериментальных условиях.
4. Люцифераза светлячка : Преимущества: При наличии АТФ, ионов магния и кислорода может катализировать окисление люциferина до оксилюциферина с выделением биолюминесценции. Подходит для использования в качестве контроля при изучении эффективности трансляции целевых генов в млекопитающих клетках, жизнеспособности клеток и in vivo ассайях имиджинга.

Заключение

При выборе предпочтительного метода модификации репортерного мРНК необходимо учитывать конкретные экспериментальные цели, исследовательские фоновые условия и экспериментальные условия. Например, если требуется высокая чувствительность, eGFP может быть лучшим выбором. Если необходима визуализация на более длинных волнах для снижения фоновых помех, то красные флуоресцентные белки, такие как mCherry, могут быть более подходящими. Кроме того, исходя из специфических потребностей в модификации мРНК (например, повышение стабильности, улучшение эффективности трансляции), можно выбрать соответствующий метод модификации.

Как первый и крупнейший CRDMO микробиологических биопрепаратов в Великом Китае, Yaohai Bio-Pharma предлагает комплексные индивидуальные решения или отдельные услуги — от синтеза РНК, инженерной модификации штаммов и их создания, разработки процессов верхнего и нижнего потока до производства субстанций лекарств на уровне GMP или не-GMP, а также услуг по фасовке и упаковке для различных модальностей, таких как mRNA, circRNA, плазмидная РНК, рекомбинантные белки, пептиды, ферменты, однодоменные антитела и ВЧК (вирусоподобные частицы) для использования в медицине и ветеринарии.

Yaohai Bio-Pharma также активно ищет глобальных партнеров среди учреждений или частных лиц и предлагает наиболее конкурентоспособное вознаграждение в отрасли. Если у вас есть вопросы, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам: [email protected]