Значењето на Развојот на Доњиот Процес (DSP)
Целиот ферментациjsки брод содржи целевен протеин или плазмид, како и продукт- и процес-поврзани нечистотии, например, агрегати, микробијални клетечки субстрати, Протеини од Домашни Клетки (HCP), ДНК од Домашни Клетки (HCD), ендотоксин и antibiotici.
Затоа, е клучно да се дизајнира ефикасен DSP, чистечки процес, за да се отстранат одредени нечистотии и да се произведе високочист јачински и висококвалитетен лек. Понатаму, оптимизацијата на чистечкиот процес може да помогне за зголемување на рекуперирањето на продуктот, намалување на трошковите, и подобрување на масштабираемоста и воспроизводивоста на процесот.
Клучни зборови: развој на процес, оптимизација и валидација, процес на очиштување, хроматографија, eliminacija na незадоволителностите, отстранување на HCP, eliminacija на HCD, отстранување на ендотоксини, денатурација и рефолдирање на протеините, асемблирање на VLP, конјугирање
Апликација: Биофармацевтички индустрија, хуман медицина, животински медицина, ваксини, рекомбинантни големи молекули биолошки, рекомбинантни биолошки, биолошки реагент
Решенија за DSP од Yaohai Bio-Pharma
Имаме широка искуство во изолација на целните протеини или плазмиодни од сложени матрици со развој и оптимизација на постпроцесот на очиштување. Постојат различни видови на единични операции кои се прилагодуваат за очиштувањето на биолошките супстанции, вклучувајќи ги центрифугирањето, филтрирањето, хомогенизацијата, алкалната лиза, ултрафилтрирањето, праштањето, денатурацијата на протеините и рефолдирањето, хроматографијата итн.
Нашите достапни услуги за развој на очиштување вклучуваат:
- Развој на целото процес на очиштување од собирањето на џела или супернатант до крајниот активен састојок.
- Оптимизација на чистењето процес според производствени и процес-поврзани нечистоти за подигнување на квалитетот и безбедноста на продуктот, нпр., HCP, HCD, ендотоксин.
- Дефинирање и оптимизација на клучните параметри во една или повеќе оперативни јединици, вклучувајќи ги лизис на ќелијата, тангенцијално тековно филтрирање, тестирање на резини, хроматографија, денатурација на протеин и рефолдирање, итн.
- Оптимизација на процесот според квалитет, отдавање, повторување, cena и масштабирање.
- Валидација на процесот за постепено чистење.
- Асесман на параметрите со основа на ризик и Дизајн на Експерименти (DoE) во моделовањето на процесот.
Детали за услугата
Стандардните платформи за чистење на протеини или плазми се базираат на повеќе примарни чистечки кораки и помалку од 4 хроматографски кораки, вклучувајќи ги капацитеранje, меѓумасно чистење и довршување.
| Детали за услугата |
Јединични операции |
Параметри |
| Примарно чистење |
Центрифугирање |
Вртежна брзина, Време |
| Хомогенизирање под висок притисок |
Збирен содржински тврд материјал, Притисок, Циклуси |
| Непрекината алкална лизе |
Односот на повторно заспратени клетки до лизисолуција, Време за лизе |
| Тангенцијална протечна филтрирање |
Материјал и величина на мембраната, Рaten на потоците, Трансмембрани притисок (TMP), Односот на филтриран јаг односно површината на мембраната |
| Прецепитање |
Тип и концентрација на прекепитант, Адитив, pH, Температура, Време |
| Денатурација и рефолдирање |
Солубилизација на протеин од вклучувачки тело |
Денатурант Концентрација (на пр., Уреа, Гуанидин HCl, Јак Ионски Детергент), Детергенти (на пр., Содиум додецил сульфат, SDS), Редуктивни Агенти (на пр., Дитиотретол, DTT), Хелатни Агенти (Етилендиаминтетраасетна киселина, EDTA), Температура, Време |
| Протеинска рефолдинга |
Методи за Рефолдинга (разредување, диализа или рефолдинга со SEC), Концентрации на протеини, Бафери, pH, Температура, Време, Оксидативни и Редуктивни Агенти (на пр., Глутатион, GSH/Оксидиран Глутатион, GSSH, DTT/GSSH, Цистеин/Цистин), Малите Молекуларни Додатоци (L-аргинин, Уреа, Гуанидин/HCl, и Детергенти) |
| Захват, Меѓупурификација и Полирање |
АК (Афинитетна Хроматографија) |
Несколку видови хроматографски резини/колона (на пр., АК, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Дужина и Пречник на Колоната, Состав на Баферот, Инјекционен Запремини, Состав на Правецот (Адсорпција и Дезорбција), pH, Број на Потоци, Услови за Приклучување, Измивање и Елюирање. |
| IEX (Хроматографија со Анионски или Катионски Замена) |
| ХИЦ (Хидрофобна Интеракција Хроматографија) |
| Отстранување на сол и/или хроматографија со изключена величина (СЕЦ) |
| РПЦ (Хроматографија со Обрната Фаза) |
| ММЦ, Микст Мод Хроматографија |
Студија на случај
Случај 1
Доверено ни е да развиеме и оптимизираме процесот на почистување од долен ток за да зголемиме чистотата на белките од 85% до 90%, додека се намалува бројот на кораци на хроматографијата.
Яохай предложи робустен и скалирачки процес на почистување со 3 кораци на хроматографија за целната белка, бактериски алерген. Крајната чистота достигна 95%.
Случај 2
Яохай беше назначена од нашето лице да оптимизира процесот на отстранување на ендотоксини за вакцината со вируски частици (ВЛП).
Нашата екип изврши оптимизација на параметрите на хроматографијата и приготви активна супстанција со чистота од 98% и остатоци на ендотоксини од 12.8ЕУ/мг.
Нашите искуства
- Бевме ангажирани во развојот и производството на различни големи молекули, вклучувајќи рекомбинантни субјединични вакцини, ВЛП-и, хормони (инсулин, ГЛП-1, растечки хормон), цитокини (Интерлеукин-2/ИЛ-2, ИЛ-15, ИЛ-21), фактори за растење (ЕГФ, ФГФ, НГФ), нанотела/едносегментни антитела (сдАбс), ензими, итн.
Уред
Користиме индустриски водечки системи AKTA Pure, AKTA Avant и Препаративна ХПЛЦ за извршување на различни хроматографски методи, вклучувајќи афинитет, ионска експозиција, хидрофобна интеракција, обратен фаза и хроматографија со размерна ексклузија.
MK
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
UR
BN
