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mRNA 酵素キャッピング

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IVT RNA

mRNA 酵素キャッピング

5' 末端キャッピングは mRNA の重要な修飾です。キャップ構造、特に Cap1 構造を持つ mRNA は、生体内での自然免疫応答を回避し、効率的なタンパク質翻訳を実現します。

酵素キャッピング（7 段階法）は、mRNA キャッピングの従来の方法で、真核生物のキャッピング プロセスに似ています。一連の酵素の作用により、7-メチルグアニン（m5G）は 5'-5' 三リン酸結合を介して mRNA の 1' 末端に結合し、メチル化修飾を受けてキャップ構造 Cap 7（mXNUMXGpppN）を形成します。

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自然なキャップ構造の形成の図

酵素キャッピング反応フローは以下のとおりです。

線状化プラスミド DNA は、T7 ポリメラーゼの存在下での in vitro 転写 (IVT) のテンプレートとして使用され、ワクシニア キャッピング酵素と 5'-O-メチルトランスフェラーゼを使用したワンステップ精製後に 2' エンドキャップ構造を持つ mRNA が形成されます。

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サービス詳細

オプションサービス

サービスの詳細

配送期間（日）

mRNA酵素キャッピング

酵素キャッピング反応

1

キャッピング反応の最適化 - オプション

反応成分の設計と最適化

3〜7

私たちの特徴
  • キャッピング反応コンポーネントの設計と最適化

キャッピング反応成分が最適化され、mRNA転写産物の生成が大幅に増加します。

  • インビトロ発現検証

キャップされたmRNAを293T細胞に導入し、標的タンパク質の発現を検出することができます。

  • RNaseの厳格な管理

RNaseson の実験環境と消耗品を厳密に管理することで、mRNA の劣化が効果的に防止されます。

ケーススタディ

Yaohai Bio-Pharma の mRNA プラットフォームは、完璧なキャッピング反応プロセスを構築しました。

酵素キャッピング法で調製したmRNA前産物であるeGFP mRNAについては、293T細胞に24時間トランスフェクトした後、高レベルのeGFP蛍光シグナル（緑色蛍光）が観察され、ウエスタンブロット（WB）で検出され、標的タンパク質である増強緑色蛍光タンパク質（eGFP）がin vitroで効率的に発現できることが実証されました。

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293T細胞における酵素キャップeGFP mRNAの発現

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