すべてのカテゴリ
ENEN
体外転写、IVT

体外転写、IVT

ホームペーじ >  IVT RNA  >  カスタムRNA合成  >  カスタムmRNA合成  >  体外転写、IVT

IVT RNA

IVT、体外転写

MRNAの大規模生産に関しては、体外転写（IVT）がより効率的で成熟した方法です。IVT反応では、T7プロモーターを含む線状化されたプラミドDNAをテンプレートとし、T7 RNAポリメラーゼの存在下でヌクレオシド三リン酸（NTPs）を基質としてmRNAが合成されます。

核酸修飾は、mRNAの研究における画期的な進展です。修飾されていないmRNA分子は、細胞内のRNAセンサーによって認識され、先天性免疫が活性化されます。mRNAの体内免疫原性や翻訳効率を考慮すると、IVTプロセスでは一般的にいくつかの修飾されたNTPsが使用され、一般的な修飾核酸にはプセウドウリジン（Ψ）、N1-メチル-プセウドウリジン（N1Ψ）、および5-メチルシトシン（5mC）があります。

undefined

MRNAの体外転写プロセス

图片

体外転写（IVT）反応の図

サービスの詳細
オプションサービス
サービス詳細
納期（営業日）
体外転写（IVT）
IVT、体外転写 1
核酸修飾（Ψ/N1Ψ/5mCなど）
DNAテンプレートの除去 (DNase I)
IVT条件の最適化 - オプション
IVT反応成分の設計と最適化 2-5
私たちの特徴
  • 多様な核酸修飾戦略

体内でのmRNAの安定性とタンパク質発現を向上させる。

  • 厳密なテスト設計と最適化

10kbまでのmRNA断片の準備が可能です。

  • 効率的な転写

IVT反応条件を最適化することで、転写効率は最大で1:200になります。

  • RNaseの厳格な管理

実験環境や消耗品を通じたRNaseの厳密な管理により、mRNAの分解を効果的に防ぐことができます。

ケーススタディ

現在のIVT反応系は、約100 ntの長さを持つ合成系に対して大まかに最適化されており、任意の長さのmRNAには対応していません。mRNA配列が長いほど、転写が難しくなり、分解しやすくなります。

約10 kbのカスタマイズされたmRNA配列を準備するために、ヤオハイ・バイオファーマは厳密な実験設計、反応条件の継続的な最適化、およびRNaseの厳格な管理を行い、1 μgの直線化されたプラスミドを体外で転写した後、高品質なサンプルを成功裏に準備し、転写比1:135という高い比率で初期精製mRNA製品135 μgを得ました。

图片

mRNA同定（アガロースゲル電気泳動）

無料見積もりを入手する

Get in touch