כל הקטגוריות
ENEN
עיצוב רצף mRNA

עיצוב רצף mRNA

עמוד הבית >  IVT RNA  >  סינתזת RNA מותאמת אישית  >  סינתזת mRNA מותאמת אישית  >  עיצוב רצף mRNA

IVT RNA

עיצוב רצף mRNA

לפי הדוגמה המרכזית, RNA שליח (mRNA) הוא הגשר להעברת חומר גנטי מ-DNA לחלבונים.

mRNA ממלא תפקיד ביולוגי על ידי קידוד חלבונים in vivo, ו-mRNA בוגר באורגניזמים אוקריוטיים מורכב מחמישה מרכיבים: 5' Cap (מבנה כובע), 5' UTR (אזור לא מקודד), ORF (מסגרת קריאה פתוחה), 3' UTR , וזנב polyA 3' (זנב פוליאדנילט).

לא מוגדר

פרטי שירותים
התַהֲלִיךשירות אופציונליפרטי השירותתקופת אספקה ​​(יום)
עיצוב ואופטימיזציה של רצף mRNAעיצוב ואופטימיזציה של רצפי קידוד

יישור רצף CDS

אופטימיזציה של קודון CDS

1
עיצוב ואופטימיזציה של רצפים שאינם מקודדים

עיצוב ואופטימיזציה של רצף UTR 5'

עיצוב ואופטימיזציה של רצף UTR 3'

עיצוב ואופטימיזציה של רצף polyA

1-2
אפשרויות הניתנות להתאמה אישית
5' UTR/3' UTR
  • רצף UTR של הטבע
  • רצף UTR מוטנטי/מהונדס
זנב 3' PolyA
  • זנב 100A ~120A (מומלץ)
  • זנב polyA מפולח
  • זנב מותאם אישית אחר
אסטרטגיות נפוצות לעיצוב רצף mRNA
רכיבי mRNAפונקציות ביולוגיותאסטרטגיות אופטימיזציה
כובע 5'הגן על mRNA מפני פירוק על ידי אקסונוקלאזות ופעל בשיתוף פעולה עם זנב ה-polyA בקצה ה-3', חלבון קושר ל-polyA וחלבון תחילת התרגום כדי ליזום תרגום חלבון.המבנה הטבעי של Cap1 נמנע מקולטני זיהוי דפוסים ובכך מפחית את התגובה החיסונית הטבעית, שניתן להשיג על ידי כיסוי קו-תעתוקתי של צעד אחד או מכסה אנזימטי דו-שלבי [ראה מכסת mRNA אנזימטית ומכסה משעתק משותפת לפרטים].
5' UTRניתן לזהות את ה-5' UTR על ידי ריבוזומים, לווסת את התרגום של mRNA ולהשפיע על יציבות ה-mRNA.מכילים רצפים של קוזאק ללא מבנה משני מאוד יציב. UTRs טבעיים של גנים בעלי ביטוי גבוה עדיפים עבור mRNAs לתעתוק מבחנה (IVT) כגון α-globin ו-β-globin.
CDSאזורים מקודדי חלבון ורצפי קידוד לאנטיגנים, נוגדנים או חלבונים פונקציונליים אחרים.אופטימיזציה של קודונים מגבירה את רמת התרגום, ומציינת שקודונים מסוימים שאינם אופטימליים עשויים למלא תפקיד בקיפול חלבון.
3' UTRלווסת תרגום ויציבות mRNA.UTRs טבעיים של גנים בעלי ביטוי גבוה מועדפים עבור IVT mRNAs כגון α-globin ו-β- globin.
זנב polyA 3'לווסת את ביטוי החלבון ולהגן על מבנה המכסה מפני השפלה.נדרש אורך הולם (100-150 bp); קידוד זנב polyA על פלסמיד תבנית השעתוק מבטיח אורך זנב polyA מוגדר יותר.
התכונות שלנו
  • בחירת מקור UTR מגוונת

מקורות מרובים של ספריות UTR טבעיות ומותאמות מאוד; אסטרטגיית שינוי UTR בוגרת;

  • צוות אופטימיזציה של CDS חדשני

שיתוף פעולה עם צוות אלגוריתמים מקצועי של AI כדי להשלים את האופטימיזציה של קודונים.

  • אפילו חלוקת זנב polyA

הוסף רצפי polyA לפי תבניות DNA כדי לשלוט באורך mRNA בצורה מדויקת יותר.

  • שילובי אופטימיזציה מגוונים

השג ביטוי יעיל של mRNA עם אימונוגניות נמוכה.

מקרה לדוגמה

עיצוב רצף של mRNA דו-מדווח: mCherry-eGFP mRNA

שירות ה-mRNA של Yaohai Bio-Pharma ממשיך להשתדרג עם תכנון ואופטימיזציה של רצף טנדם גן כפול, המשיג ביטוי משותף של גנים כפולים.

באמצעות מגיב טרנספקציה קונבנציונלי, רצף הגנים הכפולים mCherry-eGFP mRNA עובר תאי 293T, ושני אותות ניאון של mCherry (אדום) וחלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (eGFP) מזוהים בביטוי סימולטני לאחר 48 שעות, והערימה הגרף מסומן בצהוב.

图片

图片

ביטוי של mRNA mCherry-eGFP בתא 293T

קבל הצעת מחיר חינם

נהיה בקשר