בהתאם לשיטת ההצמדה האנזימטית בשני שלבים, שיטת ההצמדה הקואלוצית בצעד אחד יכולה להפחית באופן משמעותי את תהליך הזרימה. השיטה מכוונת לתוצאות ומתייחסת להוספת אנלוגים של כובע לתגובה של זרימה חיצונית (IVT). אנלוגי הכובע יכולים להוטמע בהתחלה של הזרימה, וmRNA עם מבנה כובע יתקבל לאחר סיום הזרימה. אנלוגי כובע דור שלישי נוכחיים יכולים להמנע מההצמדה הפוכה ולהוסיף ישירות מבנה כובע 1 לתוצר הזרימה.
בנימוקים של חוסן תרמי של mRNA וביעוד תרגום, תהליך ה-IVT מאמץ לעתים נקודות NTP מודיפיקציה מסוימות, והנוקלאוטידים המודיפיקציה הנפוצים הם פסיאודוורידין (Ψ), N1-מetyl-פסיאודוורידין (N1Ψ) ו-5-methylcytosine (5mC).
תמונה: דיאגרמת תגובה של mRNA Co-transcriptional ו-Capping
פרטי שירות
שירות |
פרטי שירות |
תקופת מסירה (יום עבודה) |
הצמדה Co-transcriptional |
תגובה של תרגום מחוץ לגוף (Clean Cap analog) |
1-2 |
| מודיפיקציות של נוקלאוטידים (Ψ/N1Ψ/5mC) |
| הסרת תבנית DNA (DNase I) |
השגת התנאים של IVT - אופציונלי |
עיצוב והשגת רכיבי התגובה |
3-7 |
תכונותינו
- אסטרטגיות מגוונות לשינוי נוקלאוטידים
אשכולות אופציונליות של אסטרטגיות שינוי נוקלאוטידים יכולות לשפר את ביטוי חלבונים.
השיגו יחס ת-pencil גבוה ויעילות כיסוי גבוהה.
השיגו שיעור כיסוי של יותר מ-95%.
מניעת התפורקות mRNA בצורה יעילה באמצעות בקרת מחמירה של RNase בסביבה הניסיונית ובמשתמשי חד פעמיים.
מחקר מקרה
Yaohai Bio-Pharma יצרה פלטפורמה מתוחכמת לתהליך כיסוי משולב, המשתמשת בחבורות נקיות כדי להוסיף ישירות מבנה Cap1 תוך כדי הימנעות מכיסוי הפוך. לאחר טיפול מקדים מוסדר של דגימות ובדיקה על ידי אלקטרופורזיס קפילרית (CE), שיעור הכיסוי של mRNA של חלבון הפלורסצנט הירוק המוגבר (eGFP) יכול להגיע ליותר מ-95%.
יעילות כיסוי של mRNA eGFP של יותר מ-95%
ה-mRNA של eGFP וה-mRNA של mCherry ש.prepareStatementו על ידי כיסוי-Co תרמו מסתכלים לתוך התאים 293T, בהתאמה, וסימן פלורסנטי חזק נצפה לאחר 48 שעות, מה שמעיד כי ה-mRNA מבעיר בצורה יעילת בתאים 293T.
ביטוי של mRNA של eGFP ו-mRNA של mCherry בתאים 293T
IW
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
