Tere. Kas oled kunagi mõelnud, kuidas teadlased suudavad RNA kloonida? RNA on see eriline molekul, mille me leidame oma rakkudes ja mis teeb palju asju proteiinide tootmiseks, ning need proteiinid on seal, et meie keha saaks kõik õiged asjad teha. Sellest osast läbi vaatame me teadlaste poolt kasutatavat palju huvitavamat protokolli: in vitro transkript. See tähendab lihtsalt seda, et teadlased võtavad RNA ja teevad selle testtuubis (mis on see väike labijarv, mida laboratooriumid kasutavad) palju, seega läheme igasse sammu siia.
Eelmise postitusega lõpetades arvasin, et viimane võis olla natuke kuiv – tule kaitsesse-labipostidesse; nii et, pidades vormist, nüüd kui oled täiesti foonil (ehk RNA tegemine): Millised reagenzid ja mida vajad oma EF-i jaoks?? Selleks peame me vajama erilisi proteiine, mida nimetatakse enzyymi, identset Yaohai tootele Rekombinantse midkine tootmine . See katalüüsib keemilisi reaktsioone, need enzyümid aitavad neid murda. Nüüd vajame lihtsalt meie DNA plokki. See funktsioon on DNA, mida me kasutame mallina RNA koopia tegemiseks. RNA lisareegliteks on ka nukleotiidid vajalikud. Need nukleotiidid on nagu väikesed ehituskomponendid, mida tuleb kokku panna, et teha RNA. Me kasutame ka lühikesi rörke väikese läbimõõga, et smaku hindamist muudeesse integreerida. Lõpuks vajame seadet (termo tsüklija), mis tagab, et meie reaktsioon oleks õiges temperatuuris. Lisaks võivad mõned eksperimentid nõuda mõnda tööriistu ja tooteid.
Nii et siin asjad erinevad, meil on üks RNA-lõige ja nüüd soovime rohkem koopiate sellest, ka Konjugeeritud VLP vaktsiinide tootmine mille arendas Yaohai. Viis kuidas seda saavutada on kasutada teist enzyymi; T7 RNA polümeraasi. See unikaalne enzyym tunneb näiteks kindlaid piire RNA-sisemistes piirkondades. hüppetorniks, et tekitada veelgi rohkem RNA-koopiasid järgmisel etapis. Selle punkti peale lisatakse RNA-lõigetele veel T7 RNA polümeraasi abil, kuni on loodud suur hulk transkripte või kuni me käskume see lõpetada.
Pärast RNA võimalikult täielikku eraldamist kerige edasi, et näha, kuidas tühjendada ja salvestada RNA tulevase kasutuse jaoks. Rhoades: Mõned need meetodid on veidi äärmuslikumad RNA eraldamise suhtes — seda ei kasutata alati, kuid mõnes eksperimenti tüübis see on vajalik. Kui RNA on vabastatud kõigist kontsentrantidest, saab selle müra. Nii see on turvaline ja me saame seda hiljem kasutada erinevates eksperimentides.
Algkvaliteet: veenduge, et teie DNA mall oleks puhast ja mitte kõiki ära põletatud. Võite ka lisada uuesti konstitueeritud nukleotiidid ja uuesti talvenud enzyimid, et maksimeerida edukate eksperimentide tõenäosust.
Olekute jälgimine: Kõik enzyymid ja nende nukleotiidid töötavad paremini spetsiifilisel temperatuuril ja pH-s kehas, samuti Yaohai's Punane Fluoresentsne mRNA . Nüüd muutke tingimusete vahelisi nuanseid, kuni leiate oma unikaalse seadme võtmerakenduse.
Pöörde transcriptaas on eriline enzyym, kuna see teeb RNA molekulist DNA koopia. Me kasutasime mõlemat DNAT ja DNA malli (cDNA) oma in vitro transkriptmeetodi sisendina RNA genereerimiseks. Siiski tahaksid enamik eksperimentides teadlased DNAst RNA transkribeerida. Pöörde transkriptioon on nii nimetud just sellepärast. mRNA poly-A jaotuse testimine töötas välja Yaohai. See on äärmiselt väärtuslik tööriist teaduses – alates RNA molekulite uurimisest rakudes kuni komplementaarsete DNA ahelate tootmiseks edasiste eksperimentide jaoks.
Reaalajas eksperimentides, kus RNA on üks laialdasemalt kasutatavaid molekulaartööriistu, kaasa arvatud Yaohai toote VLP Vaktsiini tootmine E. coli-s . Kvantitatiivsed uuringud: Need testid võivad avaldada, kui suur on konkreetse molekuli näidises olev määr. Näiteks saavad teadlased sünteesida in vitro transkripti koos RNA koopiatest, mis on tuletatud eesmärgiks määratud geenist, mis asub rakas. Diagnostika saab siis uurida need koopiad, eriti siis, kui nad otsivad RNA pärast, saab diagnostika käivitada polümeeratsükli reaktsiooni (PCR), et neid koopias amplifeerida. See võimaldab teadlastel vaadata, kuidas gene väljenduvad rakudes, ja lubab isegi mõned väga kiired uuringud, nagu bakteeriumi või viiruse infektsioonide olemasolu ning diagnoosida geneetilisi haigusi.
in vitro Transcript Protocol on juhtiv mikrobsettevõtte CDMO. Meie fookus on olnud mikrobiidite poolt toodetud vaktsiinide ja ravi meetodite peale, mis sobivad inim-, vetarstliku ning loomade tervise halduseks. Meil on kõige edasipääsmisemad RD platvormid ja tootmisettevõtted, mis hõlmavad tervet protsessi alates mikrobsete sündmuste arendamisest ja rakude pankrusesse panekust protsessi ja meetodi arendamiseni ning kaubandus- ja kliinilise tootmise tagamisega, mis tagab innovaatiliste lahenduste edukat toimetamist. Aja jooksul oleme me saanud laia teadmiste baasi mikrobsete bio töötlemise kohta. Üle 200 projektiks on edukalt lõpule viidud ja me aitame oma klientidel nõuetesse vastama nagu näiteks USA FDA ja EU EMA eeskirjadega. Me aitame neil ka navigeerida Austraalia TGA ja Hiina NMPA läbi. Meie professionaalne oskused ja laias ulatuses kogemus võimaldab meil kiiresti reageerida turu nõuetele ja pakkuda määratud CDMO teenuseid.
Yaohai Bio-Pharma võtab osa bioloogiliste toodete tootmisel, mis on loodud in vitro Transkriptprotokolli kohaselt. Pakume kohandatud RD ja tootmise lahendusi, tagades samal ajal, et riskide ei tekki. Oleme osalenud mitmesugustes mudeliteges, nagu subüniivaktsiinid rekombinant, peptiidihormoonid, sitokiinid, kasvufaktorid, ühe domeeni antikehad enzyymid, plasmid DNA MRNA ning paljud muud. Meie spetsialiteediks on mitmed mikroorganismid, sealhulgas jahem extratseelline ja intratseelline sekret (tootmine kuni 15g/L) ning bakteriume intratseelline ratsuvool ja inklusioonikorg (tootmine kuni 10g/L). Oleme ka loonud BSL-2 fermantatsiooniplatvormi bakteriaalsete vaktsiinide tootmiseks. Fookuseks on protsesside parandamine, toote tootmiskoguste suurendamine ning tootmiskulude vähendamine. Tugeva tehnoloogiateame abil võime tagada kiire ja usaldusväärse projektide edastamise, mis viib teie toote kiiremini turule.
Yaohai Bio-Pharma, üks bioloogiliste toodete 10 suurema tootjast, erialal on mikrobioloogiline fermantimine. Meie oleme ehitanud kaasaegse tegevuskorra tugeva RD võimega ja edasipääsmise varustusega. Meil on viis ravimitehase tootmisjoonet, mis vastavad GMP nõuetele mikrobioloogilise fermantimise ja puhastamise osas. Meil on ka kaks automaatset täitmisjoonet kartridžide, flakoonide ja eeltäidetud süsteemide jaoks. Kasutatavate fermantimisskaalad ulatuvad in vitro Transkriptiidi Protokollist kuni 2000L ni. Flakooni täitmise spetsifikatsioonid ulatuvad 1ml-st kuni 25ml-ni. Eeltäidetud hüpotükkide või kartridžide täitmise spetsifikatsioonid ulatuvad umbes 1-3ml vahel. Meie cGMP-vastane tootmissüsteem tagab kliiniliste näidiste ja kauplike toote konstantse tarnimise. Meie tööstus tootab suuri molekuleid, mida saadetakse üle maailma.
Yaohai BioPharma on üks 10 suuremat mikrobset CDMO't, mis kasutab in vitro transkriptiprotokolli ning reguleerivaid asju. Meil on kvaliteedihaldussüsteem, mis vastab praegustele GMP standarditele ja globaalsele regulatsioonile. Meie reguleerivate asjade spetsialistide meeskond on oskuslik globaalsetes reguleerivate raamistikutes, et kiirendada bioloogiliste toodete väljastamist. Me tagame jälgitavad tootmisprotsessid, kvaliteetsete toodete tootmise ning US FDA ja EU EMA reeglite täitmise. Austraalia TGA ja Hiina NMPA on ka rahul. Yaohai BioPharma on edukalt läbinud Euroopa Liidu Kvalifitseeritud Isiku (QP) kohta toimunud GMP kvaliteedisüsteemi ja tootmisasja auditu. Lisaks oleme me juba läbinud esimesed sertifikaadi auditid ISO9001 Kvaliteedihaldussüsteemi, ISO14001 Keskkonnahaldussüsteemi ja ISO45001 Tööturu Tervishoiu ja Turvahaldussüsteemi kohta.