Firefly luciferase (F-Luc) mRNA väljendab luciferaasi protzeini, mis on algul eraldatud kõrbesoomekirvastikust Photinus pyralis. See prottein emitseerib biomeetsilist valgust olemasolu korral substratiga luciferiniga.
Tulikäpse luciferase mRNA kasutatakse tavaliselt positiivseks kontrollina mRNA transfeerimisel ja toimetamissüsteemi arendamisel. Tulikäpse luciferase võib ka mammilliaankultuurides kasutada geneetilise väljenduse ja rakucvaliabilite mõõtmiseks.
Yaohai Bio-Pharma pakub muudetud või N1Ψ modifitseeritud Tuliikuna Luciferase mRNA , Cap1 struktuuriga, optimeeritud kodeerimiskoodonitega, insenerdatud UTR-ga ja 110nt polyA hälbega, et parandada mRNA stabiilsust ja tõlgetõhusust.
Toode
Tulikäpse luciferase mRNA, Cap1, poly(A) hälb, muudetud või mitte-muudetud mRNA
Toote üksikasjad
| Toode |
Tuliikuna Luciferase mRNA |
| Kataloogi number |
mP003 |
| RNA sisaldus |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Puhtus |
A260/A280 |
| Identifitseerimine ja puhasus |
Agaarosegelei elektroforees (AGE) |
| 5'Cap |
Cap1 |
| 3' poly(A) saba |
110±5 nt |
| Baasimodifikatsioon |
Muutumata, N1Ψ |
| Peen |
RNase-vaba vesi (vedelik) |
| Saatmine |
Saada kuiv jääga; või ümberligse temperatuuri all |
| Salvestus |
Vesik, temperatuuril või all -20°C; Lüöfiliseeritud pulber, temperatuuril 4°C |
| RAKENDUS |
Reporterigeened, positiivne kontroll |
Muud kohandatavad valikud
| 5' Kap |
● Täppamata
● Kap0, ko-kappitud
● Kap1, ko-kappitud
● Kap1, enzyymiline kappimine
|
| 5’ UTR/3’ UTR |
● Looduslik UTR-juht
● Mutant/Muundatud UTR-juht
|
| 3' PolyA saba |
● 100A ~120A saba (soovitatav)
● Segmenteeritud polyA saba
● Muud kohandatud sabad
|
| Muudetud nukleosiidid |
● Tavalised baasid,
● Pseudouriid (Ψ),
● N1-Meetülpseudouriid (N1Ψ),
● 5-meetülsütosiin (m5C),
● 5-meetüluuriid (m5U),
● 5-meetoksiuuriid (5moU),
● 2-tiio-uuriid (s2U),
● 2′-O-meetüli-U
● Muud
|
mRNA ettevalmistamine ja rakudes väljendamine
Võttes lineaarsete plaasmide DNA (pDNA) sisaldavaid F-Luc mRNA kodeerivaid geene nagu IVT mall, saime me pure F-Luc mRNA transkriptid koostranskriptsioonilise kappimise ja puhastamise abil, millega on kap1 struktuur ja N1Ψ muutus.
Pure F-Luc mRNA (1 μg) segiti kaubamärgiga transfeerimisainega ja transfseeriti see 293T-rakkudesse 96 kuuplaadil. Ja luciferaseassaja teostati 24 tundi pärast.
Firefly luciferase mRNA väljendamine 293T rakkudes
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
