Firefly lutsiferaasi (F-Luc) mRNA ekspresseerib lutsiferaasi valku, mis eraldati algselt tulikärbsest Photinus pyralis. See valk kiirgab substraadi lutsiferiini juuresolekul bioluminestsentsi.
Firefly lutsiferaasi mRNA-d kasutatakse tavaliselt positiivse kontrollina mRNA transfektsioonis ja kohaletoimetamise süsteemi arendamisel. Firefly lutsiferaasi saab kasutada ka imetajate rakukultuuris nii geeniekspressiooni kui ka rakkude elujõulisuse mõõtmiseks.
Yaohai Bio-Pharma pakub muutmata või modifitseeritud N1Ψ Firefly lutsiferaasi mRNA, millel on Cap1 struktuur, optimeeritud koodonid, konstrueeritud UTR ja 110 nt polüA saba, et parandada mRNA stabiilsust ja translatsiooni efektiivsust.
Toode
Firefly lutsiferaasi mRNA, Cap1, polü(A) saba, modifitseerimata või modifitseeritud mRNA
Toote info
| Toode |
Firefly lutsiferaasi mRNA |
| Kass Ei |
mP003 |
| RNA sisu |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Puhtus |
A260 / A280 |
| Tuvastage ja puhtus |
Agaroosgeelelektroforees (AGE) |
| 5'Cap |
Kork1 |
| 3' polü(A) saba |
110±5 nt |
| Aluse modifikatsioon |
Muutmata, N1Ψ |
| Fikseeritud |
RNaasivaba vesi (vedel) |
| Transport TASUTA |
Laev kuiva jääga; või ümbritseva õhu temperatuuril |
| Säilitamine |
Vedel, temperatuuril -20 °C või alla selle; Lüofiliseeritud pulber, temperatuuril 4 °C |
| taotlus |
Reportergeenid, positiivne kontroll |
Muud kohandatavad valikud
| 5' Cap |
● Korkimata
● Cap0, kaaskork
● Cap1, kaaskork
● Cap1, ensümaatiline piiramine
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Looduse UTR järjestus
● Mutant/konstrueeritud UTR järjestus
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A saba (soovitatav)
● Segmenteeritud polüA saba
● Muu kohandatud saba
|
| Modifitseeritud nukleosiidid |
● Modifitseerimata alused,
● pseudouridiin (Ψ),
● N1-metüülseudouridiin (N1Ψ),
● 5-metüültsütosiin (m5C),
● 5-metüüluridiin (m5U),
● 5-metoksüuridiin (5 mU),
● 2-tiouridiin (s2U),
● 2'-O-metüül-U
● teised
|
mRNA valmistamine ja rakkude ekspressioon
Lineariseeritud plasmiidse DNA (pDNA) võtmine F-Luc mRNA kodeerides geene IVT matriitsina, saime puhtad F-Luc mRNA transkriptid kaastranskriptsioonilise piiramise ja puhastamise teel koos cap1 struktuuri ja N1Ψ modifikatsiooniga.
Puhas F-Luc mRNA (1 μg), mis oli segatud kaubandusliku transfektsioonireagendiga, transfekteeriti 293T rakkudesse 96 süvendiga plaadil. Ja lutsiferaasi test viidi läbi 24 tunni pärast.
Firefly lutsiferaasi mRNA ekspressioon 293T rakkudes
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
