La Importancia de la Ingeniería de Cepas
La ingeniería de cepas tiene como objetivo dotar al hospedador de expresión de las características deseadas, lo cual es necesario para el desarrollo de CMC de biológicos y determina la calidad y consistencia del producto y el proceso de fabricación.
Palabras clave: ingeniería genética de cepas y selección, construcción de cepas de expresión de proteínas, ingeniería celular microbiana, ingeniería de cepas bacterianas, ingeniería de cepas de levadura, construcción de microorganismos procariotas, ingeniería de microorganismos eucariotas, cepas ingenierizadas
Aplicación: medicina humana, medicina veterinaria, vacunas, biología sintética, biológicos moleculares recombinantes, reactivos biológicos
Servicios de Ingeniería de Cepas de Yaohai Bio-Pharma
Gracias a más de 10 años de experiencia en CDMO en biológicos microbianos, hemos acumulado una amplia experiencia en la ingeniería y selección de diversos tipos de vectores plasmídicos y hospedadores microbianos (bacterias, levaduras). Podemos encontrar el mejor sistema de expresión para sus biológicos únicos.
Hemos recolectado varios hospederos microbianos con fuentes claras y CoA estándar, incluyendo
Bacterias: Escherichia coli (E. coli)
Levadura: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Detalles del Servicio
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Servicios
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Detalles del Servicio
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Cronograma mínimo/día
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Entregables
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Ingeniería de Cepas
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Supresión génica o Eliminación génica
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TBD
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Informe de ingeniería de cepas
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Inserción de genes, o Introducción de genes
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Construcción de cepas ( E. coli )
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Transformación de plásmidos (multi-anfitriones)
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5
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COA de hospedadores comerciales,
Informe de construcción de cepas
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Verificación por PCR
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Purificación de cepas
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Preservación de cepas
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Construcción de cepas (levadura)
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Preparación de células competentes de levadura
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10
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Linealización de plásmidos
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Transformación electrofórica
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Pantalla de resistencia\/deficiencia nutricional
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Purificación de cepas
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Preservación de cepas
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Pantalla de hospedador adecuado
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Extracción de ADN plasmidial o genómico
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entre 15 y 20
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Proceso de selección del huésped,
Informe de prueba de cepas modificadas
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Verificación por PCR, digestión con enzima de restricción
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Secuenciación de Gen Objetivo
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Pantalla de hospedadores de alta expresión
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Pantalla de hospedadores con estabilidad genética
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Preservación de cepas
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Estudio de Caso
Hansenula polymorpha mejorada por ingeniería aumentó el rendimiento de expresión de VLPs del HPV L1.
Hemos establecido levadura Hansenula polymorpha (H. polymorpha) plataforma de ingeniería y selección para la expresión de proteínas/péptidos recombinantes. En primer lugar, generamos H. polymorpha cepas deficientes en proteasas mediante eliminación génica dirigida. En segundo lugar, un vector que porta el gen HPV L1 fue transformado en la célula competente. H. polymorpha finalmente, seleccionamos la mejor clonación entre cientos de opciones, con estabilidad genética y propiedades de alta producción.
Características de Nuestro Servicio
Hemos demostrado experiencia en varios hospedadores microbianos, p. ej., Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) y Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
Tenemos experiencia en E. coli secreción periplásmica, expresión soluble y de cuerpos de inclusión, así como expresión intracelular o de secreción en levaduras.
No agregamos antibióticos o los añadimos bajo la guía regulatoria.
Establecemos una plataforma de tamizado de alta throughput para seleccionar cepas de alta producción y estables entre más de cien cepas candidatas.
Nos aseguramos de que el proceso de ingeniería y tamizado de cepas sea rastreable, bajo Buenas Prácticas de Gestión de Datos y Registros.
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MS
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