Plasmid: Et lille cirkulært DNA-molekyle med stort potentiale

Plasmider, små cirkulære DNA-molekyler, tjener som essentielle vektorer for DNA-rekombination i molekylærbiologisk forskning og genterapi. Udbyttet og kvaliteten af ​​plasmider er afgørende, med supercoiled-andel og endotoksinindhold er to væsentlige faktorer, der påvirker plasmidkvaliteten.

Plasmid undertyper

Plasmider ekstraheret fra Escherichia coli (E. coli) findes i forskellige undertyper: supersnoede (SC), åbne cirkulære (OC) og lineære (L) former (figur 1). Blandt dem udviser supersnoede plasmider fremragende stabilitet, antigenicitet og høj transfektion og ekspressionseffektivitet.

Figur 1. Skematisk diagram af almindelige plasmidundertyper

I agarosegelelektroforese af plasmid-DNA er rækkefølgen af ​​migrationshastighed supersnoet DNA, lineært DNA og åbent cirkulært DNA (figur 2).

Figur 2. Agarosegelelektroforesemigreringsmønster for forskellige plasmidundertyper

Yaohai Bio-Pharma har løbende forbedret sine processer og teknikker for at sikre, at den supercoilede andel af plasmider af transfektionskvalitet er ≥85 %, og andelen af ​​plasmider af forskningskvalitet er ≥50 %. Det følgende er en case-demonstration (figur 3), hvor agarosegelelektroforese kombineres med Gel-Pro Analyzer-software for at detektere den supercoilede andel.

Figur 3. Kvalitetsinspektionsresultater af plasmid supercoiled-andel

endotoksin

Endotoksin, en komponent i cellevæggen af ​​gramnegative bakterier, består primært af lipopolysaccharid A (LPS-A) som dets toksiske komponent. Under plasmidekstraktion frigives endotoksin til lysisopløsningen, hvilket i alvorlig grad påvirker effektiviteten af ​​plasmidtransfektion ind i celler. Derudover kan det aktivere uspecifikke immunresponser i celler, hvilket fører til falske positiver i eksperimenter.

Yaohai Bio-Pharma anvender en "ikke-introduktion" og "høj fjernelse" tilgang, der strengt kontrollerer brugen af ​​reagenser og materialer, der indeholder endotoksin under hele oprensningsprocessen. Virksomheden har også udviklet en effektiv metode til fjernelse af endotoksin, der tilbyder tre niveauer af endotoksinindhold: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg og ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma besidder en højkapacitets plasmidekstraktionsservicelinje, der er i stand til at levere 1 mg ekstraherede plasmider på så hurtigt som en uge. Som standard giver det mere end syv kvalitetskontrol (QC) tests for at sikre levering af højkvalitets, højstandard plasmider fra flere perspektiver.

Vi søger også aktivt institutionelle eller individuelle globale partnere. Vi tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har spørgsmål, er du velkommen til at kontakte os: [email protected]