Plasmid: Et Lille Cirkulære DNA-Molekyle med Stor Potential

Plasmider, små cirkulære DNA-molekyler, fungerer som vigtige vektorer for DNA-rekombination inden for molekylærbiologisk forskning og genterapi. Afkastet og kvaliteten af plasmider er afgørende, hvor supertrukket andel og endotoxinindhold er to betydningsfulde faktorer, der påvirker plasmidkvaliteten.

Plasmidunder typer

Plasmider, der er ekstraheret fra Escherichia coli (E. coli), findes i flere under typer: supertrukket (SC), åben cirkulær (OC) og lineær (L) former (figur 1). Af disse er supertrukne plasmider karakteriseret ved fremragende stabilitet, antigenicitet og høj transfektions- og udtryks effektivitet.

Figur 1. Skematisk diagram over almindelige plasmidunder typer

Ved agarose gel-elektroforese af plasmid-DNA er migrationshastighedsrækken supertrukket DNA, lineært DNA og åben cirkulært DNA (figur 2).

Figur 2. Agarose gel-elektroforese migrationsmønster for forskellige plasmidunder typer

Yaohai Bio-Pharma har kontinuerligt forbedret sine processer og teknikker for at sikre, at supercoiled-proportionen af transfektionsgradsplassmidder er ≥85% og at proportionen af forskningsgradsplassmidder er ≥50%. Følgende er et caseeksempel (figur 3), hvor agarosegelelektroforese kombineres med Gel-Pro Analyzer-software til at detektere supercoiled-proportionen.

Figur 3. Kvalitetskontrolresultater for plassmid-supercoiled-proportion

Endotoxin

Endotoxin, en komponent i cellevejret på Gram-negative bakterier, består hovedsagelig af lipopolysaccharide A (LPS-A) som dens giftige komponent. Under ekstraktion af plassmidder frigives endotoxin i lysat-løsningen, hvilket alvorligt påvirker effektiviteten af plassmidtransfektion i celler. Desuden kan det aktiverede ikke-specifikke immunresponser i celler, hvilket kan føre til falske positive resultater i eksperimenter.

Yaohai Bio-Pharma anvender en "ikke-introduktion" og "høj fjernelse"-tilgang, hvor der strengt kontrolleres brugen af reagenzer og materialer, der indeholder endotoxiner igennem hele rensningsprocessen. Virksomheden har også udviklet en effektiv metode til fjernelse af endotoxiner og tilbyder tre niveauer af endotoxinindhold: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg og ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma besidder en højgennemløbs plasmidudtrækningstjeneste, som kan levere 1 mg udtrukne plasmider på mindre end en uge. Som standard leveres der mere end syv kvalitetskontroltest (QC) for at sikre levering af højkvalitets-, højstandardplasmider set fra flere perspektiver.

Vi søger også aktivt globale partnere, både institutionelle og individuelle. Vi tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har nogen spørgsmål, tøv ikke med at kontakte os: [email protected]