Kvalitetskontrol og Anvendelser af Rekombinante Proteiner

Kvalitetskontrol af rekombinante proteiner er afgørende for pålideligheden og gentageligheden af eksperimentelle data. Hver enkelt trin, fra projektudformning til produktionssammenhæng, kræver strenge kvalitetskontrolstrategier.

Kvalitetskontrolstrategier

Den industrielle sektor følger strikte standardarbejdsprocedurer, mens den akademiske samfund skal forbedre fagligt viden for at forbedre datagens gentagelighed. Proteiner med specifikke biologiske anvendelser eller biochemistiske egenskaber kræver tilpassede kvalitetskontrol (QC) strategier.

Udfordrende eksempler og løsninger

Yaohai Bio-Pharma har omfattende erfaring indenfor produktion og rensete af rekombinante proteiner, sammen med et team af eksperter, der sikrer, at din proteinproduktion udføres med høj renhed. Ved hjælp af vores erfaring fra hundreder af projekter summer Yaohai op, hvordan man kan optimere proteinrensningsprocessen.

Nukleinsyre-bindende proteiner: Fjerningssteg af nucleinsyrer, såsom nukleaser eller PEI-præcipitation, er nødvendige. Forholdet A260nm/A280nm overvåges for at opdage contamination af nucleinsyrer.

Mus Ferritin Høj Kæde 1 til cryo-EM: Rensningssteg skal optimeres, og nukleaser skal tilføjes for at reducere forholdet A260nm/A280nm og sikre proteinrenhed.

Kimerisk Protein Menneskelig dsRBEC: Cellelyse bruger en buffer, der indeholder urea, fulgt af kolonnebaseret refolding for at få funktionsdygtige proteiner.

Proteiner, der Binder Divalent Cationer: Bestemte divalent cationer skal tilføjes under ekspresion og renning, og chelaterende stoffer bør undgås.

Jern-Sulfur Proteiner: Imidazol bør undgås for at forhindre forstyrrelse af [2Jern ± 2S]-klusteret og sikre korrekt proteinfoldering og funktion.

Oploselig Fragment af LLT1: Mutantdesign optimiserer formation af disulfidbinding og proteinfolding, hvilket resulterer i stabile og højafkastende proteiner.

CLK1 Kinasekristallisation: Ko-ekspression med λ-fosfatase fjerner fosfater fra fosfyringssteder, og størrelseseksklusionskromatografi (SEC) og anionskswapskromatografi bruges for at opnå homogen CLK1 uden heterogen fosfyring.

Proteiner til antigenbrug: Renhedsevaluering er nødvendig for at undgå forurening med højimmunogène proteiner. For strukturelle epitopantistoffer skal antigenens tre-dimensionelle konformation opretholdes.

Aggregeringsdygtige proteiner: Strategier såsom screening af forskellige stammer og nedgang af dyrgetemperaturen anvendes for at begrænse aggregeringsproblemer, og hurtige reningsstrategier udformes.

Endotoxinfjernelse: Metoder som positivt ladet kromatografi og polycationligandaffinitetskromatografi fjerner endotoxiner, hvilket sikrer at LPS-niveauer er under anvendelsesgrænserne.

Proteinkomplekser: Underenheder udtrykkes separat og monteres in vitro eller co-udtrykkes for at danne funktionelle komplekser. Kompleksintegritet vurderes på baggrund af homogenitet og molarmasse.

Konklusion

Produktion af protein starter med en strategisk design, hvor der tages hensyn til biokemiske egenskaber og anvendelser. Under udtryk, rensetning og kvalitetskontrol optimeres betingelser og metoder for stabilitet, ikke-aggregation og det naturlige tilstand. Rensatte proteiner bruges til forskellige efterfølgende formål, såsom biofysisk karakterisering.

Yaohai Bio-Pharma søger også aktivt globale partnere, både institutionelle og individuelle, og tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har nogen spørgsmål, tøv ikke med at kontakte os: [email protected]