Udnyttelse af bakterielle IB'er til rekombinant proteinproduktion

Bakterielle inklusionslegemer (IB'er) i rekombinant proteinproduktion tilbyder let adskillelse, stabilitet, høj ekspression og nedbrydningsresistens og kan udtrykke toksiske proteiner med biologisk aktivitet. Fremskridt i IB-forståelse åbner nye veje for behandling, med udfordringer og løsninger identificeret til fremtidig forskning.

Yaohai Bio-Pharma har mere end 10 års erfaring i produktion af rekombinante proteiner ved hjælp af mikrobielle fermenteringssystemer. Vores stærke og professionelle team af eksperter garanterer, at det oprensede refoldede protein kan nå 1.5 g/L.

Behandlingsstrategier og udfordringer for IB'er

Adskillelse af IB'er Metoder til IB-separation afhænger af proteinstruktur-funktion og anvendelsesbehov. Fysiske metoder forstyrrer celler, men kan skade proteinkvaliteten. Enzymatiske metoder forbedrer renheden, men er dyre. Skånsomme rengøringsmidler virker til klassiske IB'er, ikke ikke-klassiske. pH-kontrol er afgørende for opløselighed. Elektroforeseafsætning er enkel, men ikke skalerbar for biologisk aktive proteiner.

Solubilisering af IB'er Solubilisering af IB'er er afgørende for at genvinde aktive proteiner. Stærke denatureringsmidler beskadiger den naturlige struktur, mens ikke-denatureringsmidler ikke er egnede til klassiske IB'er. Blide solubiliseringsmidler kan opløse IB'er, mens de beskytter proteinstrukturen, men ikke alle proteiner. Fremtidigt arbejde har brug for bedre algoritmer til at vælge solubiliseringsmidler.

Renatureringsstrategier Proteinrenaturering er afgørende for funktionaliteten. In vitro-renaturering står over for udfordringer. Valg af opløsningsmiddel, proteinkoncentration, betingelser og metoder påvirker resultatet. Skånsomme solubiliseringsmidler beskytter den oprindelige struktur og forbedrer kvaliteten. Moderate koncentrationer og optimerede forhold reducerer aggregering. Kolonnebaserede metoder med monolitiske matricer giver højere renhed og udbytte.

Oprensning af renaturerede proteiner Yderligere oprensning adskiller fejlfoldede fra korrekt foldede proteiner. Traditionel kromatografi kæmper med lignende proteiner. Alternative metoder giver fordele, men kræver målproteinspecifik udvælgelse. At udvikle en universel oprensningsmetode er fortsat en udfordring.

Konklusion

IB'er tilbyder fordele ved rekombinant proteinproduktion, men udgør forarbejdningsudfordringer. Med en dybere forståelse af proteinstruktur-funktion inden for IB'er og fremskridt inden for separation, solubilisering, renaturering og oprensning, kan høj-throughput genvinding af aktive proteiner snart opnås. Dette vil sænke omkostningerne og accelerere biofarmaceutisk forskning og udvikling, hvilket vil drive industriens vækst.

Yaohai Bio-Pharma søger også aktivt institutionelle eller individuelle globale partnere og tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har spørgsmål, er du velkommen til at kontakte os: [email protected]

For flere detaljer om Yaohai Bio-Pharma, se venligst hjemmesiden: www.yaohaibio-pharma.com