Аналіз сайтаў N-гліказілявання мае вырашальнае значэнне для разумення функцый гліканаў. Yaohai Bio-Pharma выкарыстоўвае вадкасную храматаграфію-мас-спектраметрыю (LC-MS) пасля ферментатыўнага расшчаплення для сайта N-гліказілявання.
Мы ўдзельнічалі ў структурнай характарыстыкі бялку розных вялікіх малекул, у тым ліку рэкамбінантных субадзінак вакцын, нанацелаў/VHH/аднадоменных антыцелаў (sdAbs), фрагментаў антыцелаў, гармонаў/пептыдаў, цітакінаў, фактараў росту (GF), ферментаў, калагенаў, г.д.
Нарматыўныя патрабаванні да сайта N-гліказілявання
Згодна з рэкамендацыямі ICH Q6B, «для глікапратэінаў вызначаецца ўтрыманне вугляводаў (нейтральных цукроў, амінацукроў і сіялавых кіслот). Акрамя таго, у максімальна магчымай ступені аналізуюцца структура вугляводных ланцугоў, алігацукрыдны малюнак (вусікавы профіль) і сайт(ы) гліказілявання поліпептыднага ланцуга.
Аналітычны метад
| Аналіз |
Методыка |
| Сайт N-гліказілявання |
Вадкасная храматаграфія-мас-спектраметрыя (LC-MS) пасля ферментатыўнага расшчаплення |
Працэдуры
1. Ферментатыўнае расшчапленне бялку з дапамогай трыпсінаў або іншай протеазы
2. Асобны фрагмент глікапептыдаў
3. Пацвердзіце месца N-гліказілявання метадам ВХ-МС
4. Аналіз дадзеных
BE
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
MK
UR
BN
