Прафіляванне N-гліканаў мае важнае значэнне для вытворчасці біяфармацэўтычных прэпаратаў. Yaohai Bio-Pharma прадастаўляе паслугі прафілявання N-гліканаў з дапамогай вадкаснай храматаграфіі-мас-спектраметрыі (LC-MS) вызваленых і пазначаных гліканаў. Агульныя этапы падрыхтоўкі ўзору N-гліканаў ўключаюць расшчапленне глікапратэіна (GP), дэгліказіляванне, ачыстку, маркіроўку/дэрыватызацыю і цвёрдафазную экстракцыю (SPE).
Мы ўдзельнічалі ў структурнай характарыстыкі бялку розных вялікіх малекул, у тым ліку рэкамбінантных субадзінак вакцын, нанацелаў/VHH/аднадоменных антыцелаў (sdAbs), фрагментаў антыцелаў, гармонаў/пептыдаў, цітакінаў, фактараў росту (GF), ферментаў, калагенаў, г.д.
Нарматыўныя патрабаванні да прафілявання N-глікана
Згодна з рэкамендацыямі ICH Q6B, «для глікапратэінаў вызначаецца ўтрыманне вугляводаў (нейтральных цукроў, амінацукроў і сіялавых кіслот). Акрамя таго, структура вугляводных ланцугоў, структура алігацукрыдаў (вусікавы профіль) і сайт (-ы) гліказілявання поліпептыднага ланцуга аналізуюцца, наколькі гэта магчыма.
Аналітычны метад
| Аналіз |
Методыка |
| Прафіляванне N-глікана |
Аналіз вызваленых і пазначаных гліканаў метадам вадкаснай храматаграфіі і мас-спектраметрыі (LC-MS) |
Працэдуры
1. Ферментатыўнае вызваленне глікану з пептыднай N-гліказідазай F (PNGase F)
2. Дэрыватызацыя вызваленых гліканаў 2-амінабензамідам (2-АВ)
3. Ачыстка сабраных N-гліканаў на калонцы TSK Amide - 80, калі прысутнічае вялікая колькасць дэтэргентаў, нелятучых соляў або матэрыялаў са свабоднымі амінагрупамі.
4. Маркіроўка флуарэсцэнтным 2-амінабензамідам (2-АВ)
5. ВХ-МС аналіз пазначаных N-гликанов
6. аналіз дадзеных
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
