Дысульфідныя сувязі часам называюць SS-сувязямі або дысульфіднымі масткамі. Дысульфідныя масткі ўплываюць на біялагічную актыўнасць такіх біяпрэпаратаў, як пептыды, бялкі і антыцелы.
Кампанія Yaohai Bio-Pharma прапануе паслугі па аналізе дысульфідных сувязяў у асноўным на аснове вадкаснай храматаграфіі-мас-спектраметрыі (LC-MS).
Мы ўдзельнічалі ў структурнай характарыстыкі бялку розных вялікіх малекул, у тым ліку рэкамбінантных субадзінак вакцын, нанацелаў/VHH/аднадоменных антыцелаў (sdAbs), фрагментаў антыцелаў, гармонаў/пептыдаў, цітакінаў, фактараў росту (GF), ферментаў, калагенаў, г.д.
Нарматыўныя патрабаванні да дысульфідных сувязяў
У розных біяпрэпаратах існуе розная колькасць дысульфідных масткоў і іх утварэнне, што павінна быць цалкам ацэнена падчас даследаванняў характарыстыкі бялку, калі чаканая першасная амінакіслотная паслядоўнасць прадукту змяшчае амінакіслату цыстэін. Гэта таксама патрабуецца з нарматыўнага дакумента ICH Topic Q6B.
Аналітычныя метады
Аналіз |
Методыка |
Дысульфідныя сувязі |
Вадкасная храматаграфія-мас-спектраметрыя (LC-MS) пасля стрававання |
Для атрымання неабходных дадзеных для поўнай ацэнкі дисульфидных масткоў і свабодных тиолов навукоўцы з Yaohai Bio-pharma праводзяць карціраванне пептыдаў пасля пераварвання з дапамогай спецыфічнай пратэазы. Пасля гэтага прааналізуйце з дапамогай онлайн-мас-спектраметрыі LC/ES-MS (ES-MS) і/або LC/ES-MS/MS да і пасля аднаўлення.
Кампанія Yaohai Bio-pharma можа таксама правесці тэст Элмана, які з'яўляецца важнай часткай ацэнкі любога прадукту, які цалкам змяшчае цыстэін. У рамках тэсту Элмана мы дэрыватызуем сульфгідрылы з дапамогай (5,5'-дытыё-біс- [2-нітрабензойнай кіслаты]). Каб вызначыць узровень свабодных тиолов, атрыманы прадукт аналізуюць з дапамогай УФ-спектрафатаметрыі пры 412 нм.