Значэнне розробкі верагоднага процесу
Верагодны процэс (USP), які таксама называецца ферментатарным процесам, з'яўляецца адной з початковых фаз біяпрацэсінга. Мікрабіальная фермантацыя крытычна важная для высокай густасці клеткавага культуры і экспрезіі залежных генаў, што напрамую ўплывает на выхад біягалічных і іх сутачку.
У ранніх этапах развіцця біягалічных (прадкінічная або фаза 1/2) акцэнт ставіцца на развіцці маштабаваных безжывёлавых процесаў з пасярэднім выхадам і задавальненні ўсіх стандартных кваліфікацый продукту.
Падчас пазнейшых этапаў (фаза 3 ці камерцыяльная), мы сконцэнтруем увагу на выдачы, мэтоднасці, маштабаванні і воспраўленні, ствараючы працэс, які ўжывайцеся з нізкімі затратамі. Дзеянні, якія разглядаюць гэтыя праблемы, — гэта характарызацыя працэсу і даследванне валіднасці працэсу. У той час, калі звычайна выкарыстоўваюцца інструменты «якасці праз дызайн» (QbD) і дызайн эксперыментоў (DoE).
Ключавыя словы: розwicklung працэсу, аптымізацыя і валідацыя, ферментацыйны працэс, ферментацыя мікробных клетак, бакtéрыяльная ферментацыя, дрязговая ферментацыя, високая густина ферментацыі, інжынерная штама ферментацыі
Прымененне: біяфармацеўтская промысленасць, лікавіцтва для чалавека, лікавіцтва для жывёл, вакцыны, рекамбінантныя вялікія молекулярныя біялогічныя здабыtki, рекамбінантныя біялогічныя здабыtki, біялагічныя рэагенты
Рашэнні USP Yaohai Bio-Pharma
Дзякуйчы больш за 10 гадоў досведу ў мікробнай ферментацыі, Yaohai Bio-Pharma мае неабходныя знанні, каб дапамагчы развязаць вызовы ферментацыйных працэсаў. Мы можам шырока ўсталяваць стратэгіі высокай густоты ферментацыі для Escherichia coli (E. coli) секрэтаванне ў перыплазма, салубельнае інтраклеткае вырашэнне ці вырашэнне ў фарме інклужных тэлаў, а таксама дзеянне за межамі клеткі ці ўнутрыклетковае дзеянне ў дрязгах.
Сярод нашых даступных узброенняў па розвітку ферментацыі ёсць:
- Планаванне працэсу ферментацыі, выкананае ў малым маштабе 7 літраў у режыме кіраўнага дапаўнення
- Трыпачатковая валідацыя працэсу ў ферментах ў аб'ёме 7 літраў
- Паср edняя эскальгацыя працэсу да 30л/70л
Мы можам гібка праводзіць аптымізацыю многіх параметраў, каб дасягчы бажанага выходу ці адносіны, выкарыстоўваючы метад One-Time-A-Factor (OTAF) ці Design-of-experiments (DoE).
Галоўныя параметры ферментацыі пералічаны ніжэй:
Кампаненты ферментанай сярэдзіны без жывёліных кампанентоў
Без антыбіятыкаў ці з антыбіятыкамі, аб'ём інокуляту
Тэмпература росту, pH, Узроўень дысаванага кіслява (DO)
Спосаб кармлення (напрыклад, fed-batch)
Канцэнтрацыя індуктара (напрыклад, IPTG, метанал), Кастрычнае моманта (маса клетак\/OD600),
Тэмпература індукцыі, Час індукцыі
іНША.
Дэталі сервісу
| Услугі |
Тэхналагічны паток |
| Вырасканне ў колбах з вобрам (500 мл) |
Падготовка бездзеянных сярэдовых → Вырасканне мікрабіальнай сяменніцы → Вырасканне ў шэйкеры → Індукцыя → Збор |
| Вырасканне ў ферментараце (7 літр) |
Падготовка бездзеянных сярэдовых → Вырасканне мікрабіальнай сяменніцы → Високая густина ферментацыі ў біярэактары 7л → Індукцыя → Збор |
| Кантроль якасці белкаў\/пептыдаў |
Папярэднае абробатка Выраз інтраклітальнага салюбнага белка: Збор мікробных кліточак і рэзуспензія → Ультразвукавая дэстркуцыя → Адцяг клітаных адхадоў → Сырой экстракт. Выраз інтраклітальнага белка ўключэння: Збор мікробных кліточак і рэзуспензія → Ультразвукавая дэстркуцыя → Падготовка ўключэння → Сырой экстракт. Выраз зонкласнага салюбнага белка: Збор культарнага супернатанта → Кансэнтрацыя і замена буфера → Сырой экстракт. Аналіз якасці Сырой экстракт як пробы → Аналіз цэлевога белка SDS PAGE або Western blotting (WB). |
| Кантроль якасці плазмід |
Папярэднае абробатка і аналіз якасці Экстракцыя плазмід → Аналіз ДНК шляхам агаровай гелевай электрафарэзы |
Прыклад даследвання
Нам замоўленне ад нашага кліента па павышэнні выдачы цэлевага поліпептыднага гармона з 8 г/л да 10 г/л.
На аснове Пульнай Фактарыялнай Дызайн і Дызайну Паверхне Відказаў у інструментах DoE, мы швидка вылучылі і аптымізавалі ключавыя параметры ферментации. У аптымізаваным процесе ферментации з вышэйшай густотай клетак, ўзроўень экспрэсіі падняўся да 10 г/л.
Нашы досведы
- Мы працавалі з рознымі тыпамі мікробных хазяйнаў, напрыклад, E.coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) і Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
- Мы маём дасвед у E. coli секрэцыя ў перыплазматычнай прасторы, вырашэнне ў сапраўдным і незалежным відзе, а таксама ў вырашэнні ў клетцы дзеянка ці за межамі клеткі. Вынік незалежнага тэла дасягае 10г/л, пакуль вынік сапраўднага белка знаходзіцца ў дыяпазоне ад 0.5 да 15г/л.
- Мы ўключаліся ў разработку і вытвору розных вялікіх молекулаў, уключаючы рекамбінатныя суб'ектныя vakcыны, вірусна-падобныя часткі (VLPs), гармонаы (інсулін, GLP-1, грамадскі гармон), цытакіны (Інтэрлеўкін-2/IL-2, IL-15, IL-21), факторы росту (EGF, FGF, NGF), нанатэлі (однадаменныя антытэлі, sdAbs), энзымы і іншыя.
- Абладненне
7Л*16 Сістэма ферментацыі
Аналізатар Cedex Bio, Біапроцэсны аналізатар
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
