Визначэнне молекулярнай вагі праз LC-MS
Паўнаправая молекулярная вага завецца важнай характарыстыкай біягалічных працэдаў. Аналіз паўнаправой молекулярнай вагі выкарыстоўваецца для падтваржэння продуктаў белка/пептыда і верыфікацыі біягалічных працэдаў. Памер молекулярнай вагі з'яўляецца патрабаваннем рэгulaтарных дакументаў.
Yaohai Bio-Pharma афармляе аналіз паўнаправай молекулярнай вагі ў натывных, рэдагаваных, N-деглікозаваных умовах. Мы выкарыстоўваем жыдкую хроматографію-мас-спектраметрыю (LC-MS) для вызначэння паўнаправай молекулярнай вагі.
Рэгulaтарныя патрабаванні да молекулярнай вагі
У ICH Q6 сказана, што «молекулярная вага (або памер) вызначаецца з выкарыстаннем хроматографіі ў фазе разлучэння па памеру, SDS-поліакрыламіднай гелевай электрафарэзы (у рэдагаваных і нерэдагаваных умовах), мас-спектраметрыі (MS) і іншых дапушчальных тэхналогій».
Аналітычныя метады
| Аналіз |
Метады |
| Малекулярны вага |
LC-MS / Жыдкавая хроматаграфія/Электраспрыскавае мас-спектраметры (LC/ES-MS) натывных, рэдукаваных, N-деглікозылаваных белкаў ці пададзеленых на пададзелы |
Аналітычныя Працэдуры
Цэлае молекулярнае спраўжнічаць:
- Працюючы LC-MS на натывным прыкладзе, як атрымалася.
- Аналіз дадзеных LC-MS.
Рэдукаванае молекулярнае спраўжнічаць:
- Лячэнне белковага прыкладку падходзяцым рэдуктарным агентам;
- Працюючы LC-MS на рэдукаваным белку;
- Аналіз дадзеных LC-MS.
N-деглікозылаванае молекулярнае спраўжнічаць:
- Выдаленне N-гліканоў з дапамогай падходзяцей энзым;
- Проведзенне LC-MS на N-деглікозаванай белкаў;
- Аналіз дадзеных LC-MS.
Зменшана і N-деглікозаваная молекулярная вага:
- Лячэнне белковага прыкладку падходзяцым рэдуктарным агентам;
- Выдаленне N-гліканоў з дапамогай падходзяцей энзым;
- Проведзенне LC-MS на зменшанай і N-деглікозаванай белкаў;
- Аналіз дадзеных LC-MS.
Молекулярная вага пададзела белка:
- Разьем пададзела
- Проведзенне LC-MS на пададзеле белка
- Аналіз дадзеных LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
