Профіліраванне N-гліканоў з'яўляецца неабходным для выработкі біяфармацеўтыкаў. Yaohai Bio-Pharma прынімае ўдзел у працэсе прафіліравання N-гліканоў з дапамогай Жыдкавай Хроматаграфіі - Мас-Спектраметры (LC-MS) адпушчаных і маркіраваных гліканоў. Агульныя крокі падготування пробы N-гліканоў уключаюць гідралізаванне глікапротеіна (GP), адглікозаванне, чысцэнне, маркіраванне/дэратывазацыю, а таксама Спалочную Фазую Экстракцыю (SPE).
Мы ўдзельнічалі ў характарыстыцы структуры белкаў розных вялікіх молекулаў, уключаючы Рекамбінатныя Пададзелы Вакцын, Нанатэлі/ВНН/ Единственныя Дамены Антагенаў (sdAbs), Антагенныя Фрагменты, Гормоны/Пептыды, Цытайкіны, Факторы Росту (GF), Энзымы, Коллагены і іншыя.
Рэгламентаваныя патрабаванні да прафіліравання N-гліканоў
Згідна з дырэктывай ICH Q6B, «для глікапротеінаў визначаецца цукраная частка (нейтральныя цукаркі, аміназныя цукаркі і сіалавы кислоты). Прычым, структура цукраных ланцужкаў, патэрн олыгасахарыдаў (антэнны прафіль) і месцы глікавання поліпептыднага ланцуга аналізуюцца насталькі, насколькі гэта магчыма.
Аналітычны метад
| Аналіз |
Метады |
| Профіль N-глікану |
Аналіз выпушчаных і маркіраваных гліканоў за дапамогай тэхнікі расточнай хроматографіі-мас-спектраметры (LC-MS) |
Процэдуры
1. Энзымная выпуск гліканоў з выкарыстаннем пептыднага N-глікозідаза F (PNGase F)
2. Маркіраванне выпущаных гліканоў 2-амінабензамідам (2-AB)
3. Чысцэнне ўраджаных N-гліканоў на столбе TSK Amide - 80, калі ёсць вялікія колькасці дэтэрджэнтаў, няпераводных соль і субстанцый з свабоднымі амінагрупамі
4. Маркіраванне флуорэсцэнтным 2-амінабензамідам (2-AB)
5. LC-MS аналіз маркіраваных N-гліканоў
6. Аналіз дадзеных
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
