Значэнне разьвіння процесу ніжняга потока (DSP)
Цэлае бражэнне ўключае цэлевы белок або плазміду, а таксама забароненыя імкненія, звязаныя з працэсам і продуктам, напрыклад, кангламераты, мікрабіальныя клеткавыя падставы, белкі хост-клеткі (HCP), ДНК хост-клеткі (HCD), эндатоксын і антыбіятыкі.
Таму важна спроектаваць эфектыўны DSP, процес чыстання, каб выдаліць певныя забароненыя імкненія і вырабіць высокачысты і выsoкакачественный лекарственнай препарат. Працэс аптымізацыі чыстання можа дапамагчы збільшыць выдачу продукту, змяншыць затраты, а таксама павялічыць маштабы і павторнасць працэсу.
Ключавыя словы: розробка працэсу, аптымізацыя і валідацыя, працэс чысцэння, хроматаграфія, вылучэнне незачынень, аддзействанне HCP, вылучэнне HCD, аддзействанне эндатоксінаў, денатурацыя белкаў і рафалодынг, аб'яднанне VLP, кангуляцыя
Прымененне: біяфармацеўтская промысленасць, лікавіцтва для чалавека, лікавіцтва для жывёл, вакцыны, рекамбінантныя вялікія молекулярныя біялогічныя здабыtki, рекамбінантныя біялогічныя здабыtki, біялагічныя рэагенты
Рашэнні DSP Yaohai Bio-Pharma
Мы маеем шырокі досвід па альготаванні цэлевых белкаў ці плазмід ад складных матрыксоў праз розробку і аптымізацыю працэсу чысцэння ў наступным потоці. Існуе рознастайныя виды аперацый, якія падходзяць для чысцэння біялогічных здабыткаў, уключая цэнтрifulгацыю, фільтрацыю, гамагенаізацыю, алкальную лізіс, ультрафільтрацыю, выпаданне, денатурацыю белкаў і рафалодынг, хроматаграфію і інш.
Нашы доступныя сэрвісы па розрабцы чысцэння ўключаюць:
- Розрабку ўсіх этапаў працэсу чысцэння ад збору клетак ці надзвычайнага раствара да кancyйнага актыўнага інгрыдыйнта.
- Аптымізацыя працэсу чысценьня на аснове продуктавых і працэсных забрудненняў для паднешэння якасці і безапаснасці продукту, напрыклад, HCP, HCD, эндатоксін.
- Абзначэнне і аптымізацыя ключавых параметраў ў адной ці некалькіх аперацыях, уключая лізіс клетак, дыяфармэнную фільтрацыю, скрінінг рэзін, хроматаграфію, денатурацыю белкаў і перазламанне, і т.д.
- Аптымізацыя працэсу з улікам якасці, выдачы, аднаўлення, сутычных затрат і масштабавання.
- Падтварэнне працэсу чысценьня пацупальнага шляху.
- Ацэнка диапазона параметраў на аснове рыйскіх мэтодаў і Дэзынацыя Эксперыментоў (DoE) ў модэльванні працэсу.
Дэталі сервісу
Стандартныя платформы чысценьня белкаў ці плазмід заснаваны на некалькіх пачатковых кропках чысценьня і менш за 4 кропкамі хроматаграфіі, уключая захоп, промежкавае чысценьне і шліфаванне.
| Дэталі сервісу |
Аперацыі ў адзінку |
Параметры |
| Пачатковае чысценьне |
Цэнтрывуга |
Кутовая шыўдына, Час |
| Давальчая гамагенацыя |
Загалоная колькасць салідных частак, Давление, Цыклы |
| Непарвыннае алкалічнае лізіс |
Спадзешыя адносіны клетак да рашэння для лізісу, Час лізісу |
| Тангенцальная прамый фільтрацыі |
Матэрыял мембраны і пазіркавы размер, Сіла прытока ўхаднага потоку, Трансмембраннае давление (TMP), Адносіна аб'ёма фільтрату да плошчы мембраны |
| Выпаданне з рашэння |
Тып і канцэнтрацыя выпадальніка, Дадатковыя рэчывыны, pH, Температура, Час |
| Дэнатарацыя і пераскладванне |
Салодкіць белкаў тэла ўключэння |
Канцэнтрацыя денатуранта (напрыклад, урэна, гуанід HCl, магутны іонны мылк), Мылкі (напрыклад, сафій додэцыласа, SDS), Рэдукцыйныя агенты (напрыклад, дытятэтрэйтал, DTT), Хэлатуючыя агенты (эталенадыамінатэtrakавова касмід, EDTA), Температура, Час |
| Пазначэнне белка |
Метады пазначэння (разварачванне, дыаліз або SEC пазначэнне), Канцэнтрацыі белка, Бафары, pH, Температура, Час, Аксідуючыя і рэдукцыйныя агенты (напрыклад, глутатэён, GSH / Аксідаваны глутатэён, GSSH, DTT / GSSH, Цыстын / Цыстын), Дадатковыя маленькія молекулы (L-аргінін, урэна, гуанін / HCl, і мылкі) |
| Захоп, промежкавая чыстка і шліфаванне |
AC (Афіннная хроматаграфія) |
Некалькі тыпаў хроматаграфічнай смолы/стала (напрыклад, AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Дыяметр і даўжыня сталя, Склад бафара, Том ін'ектавання, Склад падвыжога фазы (адсавенне і адсорбцыя), pH, Прадух, Умовы звязвання, вымывання і элюяцыі. |
| IEX (Хроматаграфія аніянаў ці катіянаў) |
| ХИК (Хроматографія з Гідрофобным Взаімадзеяннем) |
| Адсольванне і/або хроматографія выключэння па розмёру (SEC) |
| ОГХ (Обваротная Фазовая Хроматографія) |
| ММХ, Міксаваная мода хроматографіі |
Прыклад даследвання
Прыклад 1
Нам паклadaюць развіць і аптымізаваць дапаўнічы працэс чысцэння, каб павялічыць чыстата белка з 85% да 90%, у час як зменшыўшы крокі хроматографіі.
Yaohai дастаралі робастны і масябны працэс чысцэння ў 3 крокі хроматографіі для цэлевога белка, бактэрыйнага алергена. І кancyчная чыстата дасягнула 95%.
Прыклад 2
Yaohai была назначана нашым клієнтом для аптымізацыі працэсу вымярвання эндатоксіна вірусных частак-падобных (VLP) вакцын.
Наша каманда выпалучыла аптымізацыю параметраў хроматографіі і падго塔віла леквае ўздзелы з чыстата 98% і залишкам эндатоксіна 12.8ЕД/мг.
Нашы досведы
- Мы ўдзельнічалі ў розробцы і вытворчасці розных вялікіх молекулаў, уключна рекамбінатных субунітных vakcyн, VLP-аў, гармонаў (інсулін, GLP-1, гармона росту), цытокін (Інтэрлеўкін-2/IL-2, IL-15, IL-21), фактараў росту (EGF, FGF, NGF), нанатэлаў/адносіновых антыгенных тэлаў (sdAbs), энзымоў і іншага.
Абладненне
Мы карыстаемся промысловымі сістэмамі AKTA Pure, AKTA Avant і Підготавленчай HPLC для выканання розных хроматаграфічных метадаў, уключна афіннай, іоннай заменай, гідрофобным взаимадзеяннем, абваротнай фазай і хроматаграфіяй па размерах.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
