Деамідацыя бокавых ланцугаў глутаміну і аспарагіна — частая модыфікацыя, якая ўплывае на ўласцівасці белка біяфармацеўтыкаў. Деамідацыя можа адбыватися і ў рэзідуах глутаміну, але звычайна з намнош чыста ніжшай швиддасцю. Швиддасці деамідацыі ўплываюць температура, pH, лакальная структура белка і сумежныя аміннабелковыя рэзідуы.
Yaohai BioPharma прапаноўвае сэрвіс тэставання деамідацыі амінных кіслатаў, які дазваляе выявіць деамідацыю амінных кіслатаў за дапамогай Жидка-Хроматографіі-Мас-Спектраметры (LC-MS).
Мы ўдзельнічалі ў характеристыцы структуры белка розных вялікіх молекулаў, уключна Рекамбінантных Пададзельных Вакцын, Нанатэлаў/VHHs/Адносіновых Антыйнаў (sdAbs), Адментальных Ускладненняў, Гормонаў/Пептыдаў, Цытайнаў, Фактараў Росту (CF), Энзымоў, Коллагенаў і ц.д.
Рэгламентныя патрабаванні да деамідацыі амінных кіслатаў
Згідна з дырэктывамі ICH Q6B, дэамідовыя формы могуць быць выявлены і апісаны шляхам хроматаграфічных, электрафарэзных і/або іншых рэляўных аналітычных метадаў.
Аналітычныя метады
| Аналіз |
Метады |
| Дэамідацыя |
Жыдкавая хроматаграфія-мас-спектраметрыя (LC-MS) |
Процэдуры
напрыклад, дэамідацыя аспартату
1. Энзымная дыгестыя
2. LC-MS у ўмовах високапрадуктыўнай жыдкавай хроматаграфіі (HPLC)
3. Аналіз дадзеных
Дэамідацыя аспарагіну адбываецца праз промежкуючы сукцынімід (Suc), які паддаецца рацэмізацыі і гідралізе, выдавая чатыры изамеры Асп, уключна L-Асп, L-Ізоасп, D-Асп і D-Ізоасп.
Теорэтычна, дэамідацыя глутаміну можа вырабіць чатыры адпаведныя изамеры Глу праз падобны працэс да дэамідацыі Асн.
Высокая раздzielіцькая маса-спектраметрыя лёгка ідэнтыфікуе 1-Da мадальную розніцу паміж пептыдамі, якія ўтрымліваюць Asn/Gln, і іх адпаведнымі дэамідацыйнымі каунтарпартамі Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
