Şerit Seçiminin Önemi
Biyolojik ürünler için CMC geliştirmede uygun konakları seçmek gerekir, bu da ürün ve üretim sürecin kalitesini ve tutarlılığını belirler. Konak seçiminin doğrudan amacı, geçiş kararlılığı ve depolama kararlılığı açısından yüksek ifade düzeyine ve yüksek kararlılığa sahip aday birincil hücre bankası (PCB) sağlamaktır. Uygun konakların seçilmesi iki ana nedenle gerekli olmaktadır:
- İlk olarak, yüksek ifade seviyesine sahip mikrobiyal konak seçmek için. Çeşitli ticari ştamlar mevcut olup, bu ştamlar farklı türdeki proteinleri ifade etmek için kullanılır, örneğin zehirlilik proteinleri, çözünür proteinler veya eukaryotik proteinler gibi.
- İkinci olarak, genetik olarak kararlı konakları eklemektir. Genetik kararlılık testi, üretim yaşam döngüsü boyunca önemli bir noktadır. Yüksek genetik kararlılığın, uygun şerit için başka bir anahtar özellik olarak kabul edildiği önerilmektedir.
Anahtar kelimeler: mikrobiyal ırk seçimi, mikrobiyal ırk ekranı, bakteri veya maya için yüksek geçişli ekranlama, yüksek üreten ırk ekranı, çok kararlı ırk ekranı, genetik olarak kararlı ırk ekranı Uygulama: insan tıbbı, hayvan tıbbı, aşı, sentetik biyoloji, rekombinant büyük molekül biyolojikler, biyolojik reaktif
Yaohai Bio-Pharma'nın İrk Ekranlama Hizmetleri
Mikrobiyal biyolojiklerde 10 yıldan fazla CDMO deneyimimiz sayesinde, rekombinant alt birim aşılar, virüs benzeri parçacıklar (VLP), hormonlar (insulin, GLP-1, büyüme hormonu), sitokinler (Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), büyüme faktörleri (EGF, FGF, NGF), nanovücutlar/Tek-domän antijenler (sdAbs), enzimler vb. çeşitli büyük moleküllerin geliştirmesi ve üretimi destekliyoruz.
Birçok tür plazmid vektör ve mikrobiyal ev sahibi, özellikle bakteri dahil olmak üzere seçim konusunda zengin deneyim kazandık Escherichia coli (E. coli), ve hamur酵母 Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorfa). Benzersiz biyolojikleriniz için en iyi ifade sistemini bulabiliriz.
Açık kaynaklar ve standart CoA ile çeşitli mikrobiyal ev sahipleri topladık, bunların arasında E.coli ifade ve maya ifadesi yer alır.
Hizmet Ayrıntıları
|
Hizmetler
|
Hizmet Ayrıntıları
|
Minimum zaman çizelgesi/gün
|
Teslim Edilebilirler
|
|
Klon Inşası (E. coli)
|
Plazmid dönüşümü (çoklu ev sahipleri)
|
5
|
Ticari ev sahiplerinin COA'sı Klon inşası raporu
|
|
PCR doğrulaması
|
|
Şirim temizleme
|
|
Şirim koruma
|
|
Şirim Oluşturma (Meyve mantarı)
|
Uygun meyve mantarı hücreleri hazırlama
|
10
|
|
Plazmid doğrusallaştırma
|
|
Elektro transformasyon
|
|
Dayanıklılık\/Besin eksikliği ekranlama
|
|
Şirim temizleme
|
|
Şirim koruma
|
|
Uygun Evsahibi Ekranlama
|
Plazmid veya Genom DNA çıkarma
|
15-20
|
Mühendislikli şeritlerin ev sahibi ekranlama süreci COA
|
|
PCR doğrulaması, kısıt enzimi soyulması
|
|
Hedef Gen Sıralaması
|
|
Yüksek ifade eden ev sahiplerinin ekranlanması
|
|
Genetik olarak istikrarlı ev sahiplerin ekranlanması
|
|
Şirim koruma
|
Durum İncelemesi
Uygun bir ev sahibi, protein ifadesini 2,5 kat artırmaya yardımcı olur.
Yüksek verimli üretimi geliştirmek için görevlendirildik E. coli şeridi. Ve hedef proteinin özelliklerine göre üç tür ticari E. coli ev sahibini denedik. S1-1 ve S1-2 şeritleri (Şekil A: Band 1,2) müşteri şeridine göre (Şekil A: Band 3) protein seviyesini 3,5 kat artırdığı gösterildi.
Ayrıca, S1-1 şeridi yüksek genetik istikrar sergiledi (Şekil B), ve başlangıç hücre bankacılığı (PCB) için aday şerit olarak tanımlandı.
Hizmet Özelliklerimiz
Çeşitli mikrobiyal evsahiplerle ilgili kanıtlanmış uzmanlık, örneğin, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink ırkı1/2/3/4; S. cerevisiae ve H. polymorpha .
Tecrübeliyız E. coli periplazmik sekrezyon, çözünebilir ve inklüzyon vucudu ifadesi, ayrıca maya intrasellüler veya sekrezyon ifadesi. Hiçbir antibiyotik eklemiyoruz veya düzenleyici rehberlik altında antibiyotik ekliyoruz.
Yüksek geçişli bir ekran platformu oluşturuyoruz, böylece yüzlerce aday ırk arasından yüksek üreten ve kararlı ırkları ayırt etmek için kullanabiliriz.
İyi Veri ve Kayıt Yönetimi kapsamında, ızgara mühendisliği ve ekranlama sürecinin izlenebilir olduğundan emin olunur.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
