Glutamin ve asparajin yan zincirlerindeki deamidasyon, protein biyofarmasötiklerinin özelliklerine etkisi açısından yaygın bir değişimdir. Deamidasyon, glutamin kalanlarında da meydana gelebilir, ancak genellikle çok daha düşük bir oranda. Deamidasyon oranları, sıcaklık, pH, yerel protein yapısı ve komşu aminokarboxilat kalanları tarafından etkilenebilir.
Yaohai BioPharma, Aminokasit Deamidasyonu Testi hizmetini sunmaktadır; bu hizmet sayesinde Aminokasit Deamidasyonunu Sıvı Kromatografi-Mass Spektrometri (LC-MS) ile tespit edebilirsiniz.
Rekombinant Alt Birim Aşılar, Nanovüçgenler/VHH'ler/ Tek-domen Antikorlar (sdAbs), Antikor Parçaları, Hormonlar/Peptidler, Sitokinler, Büyüme Faktörleri (CF), Enzimler, Kolajenler vb. çeşitli büyük moleküllerin Protein Yapısal Karakterizasyonu ile ilgili çalışmalara dahil olduk.
Aminokasit Deamidasyonu İçin Düzenleyici Gereksinimler
ICH Q6B yönergelerine göre, deamidasyon formları kromatografik, elektroforetik ve/veya diğer ilgili analitik yöntemlerle tespit edilebilir ve karakterize edilebilir.
Analitik Yöntemler
| analiz |
Yöntemler |
| Deamidasyon |
Sıvı Kromatografi-Mass Spektrometri (LC-MS) |
İşlemler
örn., aspartik deamidasyon
1. Enzimatik sindirim
2. Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografi (HPLC) koşulları altında LC-MS
3. Veri analizi
Asparajin deamidasyonu, raselemasyona ve hidrolize duyarlı bir süksinimid ara ürünü (Suc) aracılığıyla gerçekleşir ve bu da dört Asp izomerini verir, bunlar arasında L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp ve D-IsoAsp bulunur.
Teoride, Gln deamidasyonu, Asn deamidasyonuna benzer bir süreçle dört karşılık gelen Glu izomerini oluşturabilir.
Yüksek çözünürlüklü kütle spektrometrisi, Asn/Gln içeren peptitler ve bunların karşılık gelen deamidasyonlanmış Asp/Glu halleri arasındaki 1-Da kütle farkını kolayca tanır.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
