Význam skríningu kmeňov
Skríning vhodných hostiteľov je nevyhnutný pre vývoj biologických CMC, ktorý určuje kvalitu a konzistenciu produktu a výrobného procesu. Priamym cieľom skríningu hostiteľa je poskytnúť kandidátsku primárnu bunkovú banku (PCB) s vysokými hladinami expresie a vysokou stabilitou, pokiaľ ide o stabilitu pasáže a stabilitu pri skladovaní. Skríning vhodného hostiteľa je potrebný z dvoch hlavných dôvodov:
- Najprv vyberte mikrobiálneho hostiteľa s vysokou úrovňou expresie. Existuje viacero komerčne dostupných kmeňov, ktoré sa používajú na expresiu rôznych typov proteínov, ako sú toxické proteíny, rozpustné proteíny alebo eukaryotické proteíny.
- Po druhé, skríning hostiteľa s genetickou stabilitou. Testovanie genetickej stability je kľúčovým bodom počas celého životného cyklu výroby. Predpokladá sa, že vysoká genetická stabilita je uznávaná ako ďalšia kľúčová charakteristika vhodného kmeňa.
Kľúčové slová: výber mikrobiálnych kmeňov, skríning mikrobiálnych kmeňov, vysokovýkonný skríning baktérií alebo kvasiniek, skríning vysokoprodukčných kmeňov, skríning vysoko stabilných kmeňov, skríning geneticky stabilných kmeňov Aplikácia: humánna medicína, medicína zvierat, vakcína, syntetická biológia, rekombinantná veľká molekula biológia, biologické činidlo
Služby skríningu kmeňov spoločnosti Yaohai Bio-Pharma
Využívajúc viac ako 10-ročné skúsenosti CDMO v mikrobiálnej biológii, podporujeme vývoj a výrobu rôznych veľkých molekúl, vrátane rekombinantných podjednotkových vakcín, vírusom podobných častíc (VLP), hormónov (inzulín, GLP-1, rastový hormón), cytokínov ( interleukín-2/IL-2, IL-15, IL-21), rastové faktory (EGF, FGF, NGF), nanobody/jednodoménové protilátky (sdAb), enzýmy atď.
Nazhromaždili sme bohaté skúsenosti s výberom rôznych typov plazmidových vektorov a mikrobiálnych hostiteľov vrátane baktérií Escherichia coli (E. coli), a kvasnice Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Môžeme nájsť najlepší expresný systém pre vaše jedinečné biologické látky.
Zhromaždili sme rôznych mikrobiálnych hostiteľov s jasnými zdrojmi a štandardným CoA vrátane E.coli expresia a expresia kvasiniek.
Detaily služby
|
Služby
|
Detaily služby
|
Minimálna časová os/deň
|
dodávky
|
|
Konštrukcia kmeňa (E. coli)
|
Transformácia plazmidu (viacerí hostitelia)
|
5
|
COA komerčných hostiteľov Správa o stavbe kmeňa
|
|
PCR overenie
|
|
Čistenie kmeňa
|
|
Konzervácia kmeňa
|
|
Konštrukcia kmeňa (kvasinky)
|
Príprava kompetentných kvasinkových buniek
|
10
|
|
Linearizácia plazmidu
|
|
Elektro transformácia
|
|
Skríning rezistencie/nutričného deficitu
|
|
Čistenie kmeňa
|
|
Konzervácia kmeňa
|
|
Vhodný skríning hostiteľa
|
Extrakcia plazmidovej alebo genómovej DNA
|
15-20
|
Proces skríningu hostiteľaCOA upravených kmeňov
|
|
PCR overenie, štiepenie reštrikčnými enzýmami
|
|
Sekvenovanie cieľových génov
|
|
Skríning hostiteľov s vysokou expresiou
|
|
Skríning hostiteľov s genetickou stabilitou
|
|
Konzervácia kmeňa
|
Prípadová štúdia
Vhodný hostiteľ zvyšuje hladinu expresie proteínu 2.5-krát.
Sme poverení vývojom vysoko produkčných E. coli kmeň. A vyskúšali sme tri druhy reklamy E. coli hostiteľov na základe charakteristík cieľového proteínu. Ukázalo sa, že kmeň S1-1 a S1-2 (obr. A: dráha 1,2, 3.5) zlepšil hladinu proteínu na 3-násobok oproti pôvodnému kmeňu klienta (obr. A: dráha XNUMX).
Okrem toho kmeň S1-1 vykazoval vysokú genetickú stabilitu (obr. B) a bol uznaný ako kandidátsky kmeň na primárne bunkové bankovníctvo (PCB).
Funkcie našich služieb
Preukázaná odbornosť s rôznymi mikrobiálnymi hostiteľmi, napr. E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink kmeň 1/2/3/4; S.cerevisiae a H. polymorpha.
Máme skúsenosti s E. coli periplazmatická sekrécia, expresia rozpustných a inklúznych teliesok, ako aj kvasinková intracelulárna alebo sekréčná expresia. Nepridávame žiadne antibiotiká alebo pridávame antibiotiká podľa regulačných pokynov.
Vytvárame vysokovýkonnú skríningovú platformu na skríning vysoko produkčných a stabilných kmeňov z viac ako sto kandidátskych kmeňov.
Je zaistené, že proces kmeňového inžinierstva a skríningu je vysledovateľný v rámci Good Data and Record Management.
SK
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
