Význam inžinierstva štraniek
Cieľom inžinierstva štraniek je dostať expresný hostiteľ s očakávanými vlastnosťami, čo je nevyhnutné pre vývoj CMC biologic a určuje kvalitu a konzistenciu produktu a výrobného procesu.
Kľúčové slová: genetické inžinierstvo štraniek a ich vyberanie, zostavovanie štránok na baze białkovej exprésii, mikrobiálne bunčité inžinierstvo, bakteriálne štrankové inžinierstvo, droždielne štrankové inžinierstvo, zostavovanie prokaryotických mikroorganizmov, eukaryotické mikrobiálne inžinierstvo, inžinierstvo štraniek
Aplikácia: ľudská medicína, veterinárna medicína, vakcíny, syntetická biológia, rekombinantné veľkomolekulové biologické látky, biologické reaktív
Služby inžinierskeho návrhu štamlí spoločnosti Yaohai Bio-Pharma
Ďakujeme viac ako 10 rokom skúseností z CDMO v oblasti mikrobiologických liekov, kde sme si nahromadili bohaté skúsenosti s inžinierstvom a výberom rôznych typov plazmidových vektorov a mikrobiologických hostiteľov (baktérií, kvasinky). Dokážeme nájsť najlepší expresný systém pre vaše jedinečné biologicumy.
Zbierame rôzne mikrobiálne hostiteľov s jasnymi zdrojmi a štandardným CoA, vrátane
Baktérie: Escherichia coli (E. coli)
Kvasinka: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Podrobnosti služby
Služby
|
Podrobnosti služby
|
Minimálny časový rámec/Den
|
Výstupy
|
Inžinierstvo štám
|
Vypnutie genu, alebo Vymazanie genu
|
TBD
|
Správa o inžinierskom konšruování štamu
|
Zavedenie genu, alebo Vloženie genu
|
Konštrukcia štamu ( E. coli )
|
Transformácia plazmidu (viacero hostiteľov)
|
5
|
COA komerčných hostiteľov,
Správa o vytvorení štamu
|
Verifikácia PCR
|
Čistenie štamu
|
Konzervácia štamu
|
Vytvorenie štamu (droždie)
|
Príprava kompetentných bunk droždiev
|
10
|
Linearizácia plazmidu
|
Elektrotransformácia
|
Test odolnosti/nedostatku výživy
|
Čistenie štamu
|
Konzervácia štamu
|
Výber vhodného hostiteľa
|
Extrákcia DNA plazmidu alebo genomu
|
15-20
|
Proces vyhodnocovania hostiteľa,
Testovací spravodaj o inžinierovaných štamocho
|
Verifikácia PCR, digestia reštrikčnou enzymom
|
Sekvencovanie cieľového genu
|
Výber hostiteľov s vysokou expresiou
|
Výber hostiteľov s genetickou stabilitou
|
Konzervácia štamu
|
Prípadová štúdia<br>
Inžiniersky upravený Hansenula polymorpha zvýšil výstup expresie VLP HPV L1.
Založili sme kvasinky Hansenula polymorpha (H. polymorpha) inžinierskej a vyhľadávacej platformy pre expresiu rekombinantných bílkovín/peptidov. Najprv sme vytvorili H. polymorpha štrény s nedostatkom proteáz pomocou cieľového vymazania genu. Druhou fázou bola transformácia vektora nesúceho gen HPV L1 do kompetentnej H. polymorpha bunky. Nakoniec vyberieme najlepšiu kópiu z stoviek možností, ktorá má genetickú stabilitu a vlastnosti vysoké produkcie.

Charakteristiky našich služieb
Dokázali sme si vybudovať expertizu v rôznych mikrobiálnych hostiteliach, napr. Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink štrám1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) a Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
Máme skúsenosti s E. coli extraplazmatickou sekreciou, rozpustným a expresiou inklúziových telies, ako aj expresiou v drote alebo sekreciou v drožadiach.
Nepridávame žiadne antibiotiká alebo pridávame antibiotiká pod riadením regulatívnych noriem.
Vytvoríme platformu pre vysokopriečnostné testovanie na vyšetrenie výkonných a stabilných štrien z viac ako stoviek kandidátskych štrien.
Uistíme sa, že proces inžinierskeho návrhu a vyšetrovania pôsobivosti je sledovateľný, v súlade s Dobrej Praxou v Oblasti Správy Dát a Záznamov.