Disulfidové väzy sa niekedy nazývajú S-S väzy alebo disulfidové mosty. Disulfidové mosty ovplyvňujú biologicznú aktivitu biologickej liečivovej látok, ako sú peptídy, proteiny a antitily.
Yaohai Bio-Pharma ponúka služby analýzy disulfidových väzúb predovšetkým na báze Ťapadlovej Chromatografie-Masovej Spektrometrie (LC-MS).
Boli sme zapojení do charakterizácie štruktúry proteínov rôznych veľkých molekúl, vrátane rekombinantných podjednotkových vakcín, nanotěles/VHHs/jednodoménových antitela (sdAbs), fragmentov antitela, hormónov/peptidov, cytokínov, rastových faktorov (GF), enzymov, kolagénov atď.
Regulačné požiadavky pre disulfidové väzy
V rôznych biologickejch liečivách sú rôzne počty a formácie disulfidových mostov, ktoré by mali byť úplne zhodnotené počas štúdií charakterizácie proteínov, ak očakávaná primárna amino kyselinná postupnosť produkty obsahuje amino kyselinu cysteín. Toto je tiež požadované z regulačného dokumentu ICH Topic Q6B.
Analytické metódy
Analýza |
Metódy |
Disulfidové väzy |
Kapalinová chromatografia s hmotnostnou spektrometriou (LC-MS) po hydrolyze |
Pre nevyhnutné údaje na plnú hodnotenie disulfidových mostcov a voľných thiolov vedeči spoločnosti Yaohai Bio-pharma vykonávajú mapovanie peptidov po hydrolyze pomocou špecifického proteázu. Následne analyzujú pomocou on-line LC/Elektrospray Ionizačnej Hmotnostnej Spektrometrie (ES-MS) a/alebo LC/ES-MS/MS pred a po redukcii.
Spoločnosť Yaohai Bio-pharma môže tiež vykonať Ellmanov test, ktorý je dôležitou súčasťou ľubovoľnej úplnej hodnoty produkty obsahujúce cysteín. V rámci Ellmanovho testu derivatizujeme sulfhydrilové skupiny pomocou (5,5'-dithio-bis-[2-nitrobenzoic acid]). Na určenie úrovne voľných thiols sa výsledný produkt analyzuje pomocou UV spektrofotometrie pri 412nm.