A Importância da Engenharia de Linhagem
A engenharia de linhagem tem como objetivo dotar o hospedeiro de expressão das características desejadas, sendo essencial para o desenvolvimento CMC de biológicos e determinando a qualidade e consistência do produto e do processo de fabricação.
Palavras-chave: engenharia genética de linhagem e triagem, construção de linhagem para expressão de proteínas, engenharia celular microbiana, engenharia de linhagem bacteriana, engenharia de linhagem de leveduras, construção de microrganismos procarióticos, engenharia de microrganismos eucarióticos, linhagem engenheirada
Aplicação: medicina humana, medicina veterinária, vacinas, biologia sintética, biológicos de moléculas grandes recombinantes, reagentes biológicos
Serviços de Engenharia de Linhagem da Yaohai Bio-Pharma
Beneficiando-se de mais de 10 anos de experiência em CDMO em biológicos microbianos, acumulamos rica experiência na engenharia e seleção de vários tipos de vetores plasmídicos e hospedeiros microbianos (bactérias, leveduras). Podemos encontrar o melhor sistema de expressão para seus biológicos únicos.
Coletamos vários hospedeiros microbianos com fontes claras e CoA padrão, incluindo
Bactérias: Escherichia coli (E. coli)
Levedura: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Detalhes do Serviço
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Serviços
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Detalhes do Serviço
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Prazo mínimo/dia
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Entregáveis
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Engenharia de Linhagem
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Knock-out de gene ou deleção de gene
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Tbd
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Relatório de engenharia de linhagem
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Inserção de gene, ou Introdução de gene
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Construção de Linhagem ( E. coli )
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Transformação de plasmídeo (multi-hospedeiros)
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5
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COA de hospedeiros comerciais,
Relatório de construção de linhagem
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Verificação por PCR
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Purificação da cepa
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Preservação da cepa
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Construção de Cepa (Levedura)
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Preparação de células de levedura competentes
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10
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Linearização de plasmídeo
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Transformação eletroquímica
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Triagem de resistência\/deficiência nutricional
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Purificação da cepa
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Preservação da cepa
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Triagem de hospedeiro adequado
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Extração de DNA plasmídico ou genômico
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15-20
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Processo de triagem do hospedeiro,
Relatório de teste de cepas modificadas
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Verificação por PCR, digestão com enzima de restrição
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Sequenciamento de Gene Alvo
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Triagem de hospedeiros de alta expressão
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Triagem de hospedeiros com estabilidade genética
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Preservação da cepa
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Estudo de Caso
A Hansenula polymorpha modificada melhorou o rendimento de expressão do HPV L1 VLP.
Nós estabelecemos levedura Hansenula polymorpha (H. polymorpha) plataforma de engenharia e triagem para a expressão de proteínas/péptidos recombinantes. Em primeiro lugar, gerámos H. polymorpha estirpes de deficiência de protease por deleção genética direcionada. Em segundo lugar, um vetor portador do gene HPV L1 foi transformado no vírus competente. H. polymorpha célula. Finalmente, selecionamos o melhor clone entre centenas de opções, com estabilidade genética e propriedades de alta produção.
Características dos Nossos Serviços
Demonstramos expertise em vários hospedeiros microbianos, por exemplo, Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) e Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
Temos experiência com E. coli secreção periplasmática, expressão solúvel e corpo de inclusão, bem como expressão intracelular ou secreta em leveduras.
Não adicionamos antibióticos ou os adicionamos sob orientação regulatória.
Estabelecemos uma plataforma de triagem de alta throughput para identificar cepas de alta produção e estáveis entre mais de cem cepas candidatas.
Garantimos que o processo de engenharia genética e triagem seja rastreável, sob Boas Práticas de Gestão de Dados e Registros.
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