Alle kategorier
Tag-fri proteinforberedelse

Tag-fri proteinforberedelse

Hjemmeside >  Microbial CDMO  >  Forskning & Oppdagelse  >  Tag-fri proteinforberedelse

Tag-fri proteinforberedelse

Proteintags, som brukes som fusionspartnere i rekombinant DNA-teknologi, gjør det mulig å utføre effektiv enkeltskritt affinitetsrenasjon av ulike proteiner/peptider med forskjellige egenskaper. Trods denne viktige fordelen kan tags som ekogene aminosyurer endre proteinstrukturen og biologiske funksjoner. Derfor er tag-løse (tag-free) proteiner eller peptider mer foretrukne for å sikre sikkerhet og effekt, spesielt innen biomedisinfeltet. En rekombinant protein med en fusjonstag har begrensede muligheter for å få tillatelse fra medisinsk/legemiddeladministrasjonsmyndigheter.

På grunnlag av Plattformen for mikrobiell biologisk R&D tilbyr Yaohai Bio-Pharma tilpassede tjenester for forberedelse av tag-løse (Tag-free) proteiner dedikert til å oppfylle unike mål for forskning, utvikling og produksjon for klinisk bruk.

Nøkkelord: produksjon av tag-fri protein, renasjon av ikke-tagget protein, forberedelse av tag-basert protein uten tag, uttrykk og renasjon av protein uten tag, høygradig tag-fri målprotein

Anvendelse: forskning i menneskelig medisin, utvikling av dyremedisin, utvikling av rekombinante vaksiner, produksjon av rekombinante store molekylære biologiske produkter

Vår Mikrobielle R&D-plattform

Vi har erfaring med mikrobiell strengmodifisering, fermertasjon og produktrenasjon.

Bakterier: Escherichia coli (E. coli)

Gjær: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Tilpassede alternativer
Modalitet Rekombinant Protein
Utgangsmaterialer Gensekvenser, rekombinant plasmid eller utformet strekk
Leveringsvarer Renske: >80%, >85%, >90% Menge: 0.2~10 g (å bestemmes av prosjektet)
Ekspressjonssystem og form

E. coli periplasmisk sekresjon, løselig og inklusjonslegeme-ekspressjon;

Gjæringsintracellulær eller sekresjons-ekspressjon

Analysemetoder Ultraviolett (UV), bicinchoninnsyreassay (BCA), Bradford eller Lowry for mengde
Natrium dodecyl-sulfat polyacrylamide gel elektrofose (SDS-PAGE) for renhetstesting
Valgfritt: Western blot (WB), enzym-koblet immunosorbent assay (ELISA), høytrykksvedkommende flytning (HPLC)
Tilblivne forurensninger Endotoksin (valgfri)
Tjenestedytninger

Tjenester

Tjenestedytninger

Minste tidsramme (arbeidsdag)

Genesynthese

Kodonoptimalisering for spesifikk uttrykksvert

7~10 dager

Genesynthese

Plasmid/vektorkonstruksjon

Kloning inn i plasmid/vektor

2 dager

Plasmidtransformasjon

Polymerasekjedereaksjons (PCR) verifisering, restriksjonsenzymfordeling, gensekvensering

3 dager

Proteinuttrykk i E. coli

Plasmidtransformasjon,

2 dager

Odling i rysteflask

3 dager

7L-skala fermentering, optimisering

4 dager/batch

Tag-fri proteinrenasjon, optimisering

5~10 dager/batch

Testing ved sodium dodecyl-sulfat polyacrylamide gel elektroforese (SDS-PAGE)

Proteinuttrykk i gjerme

Forberedelse av gjerme kompetente celler

4 dager

Plasmidlinearisering og elektro-transformasjon

7L-skala fermentering, optimisering

5 dager

Tag-fri proteinrenasjon, optimisering

7 dager/batch

Proteinrensa uten tagg

5~10 dager/batch

Kvalitetskontroll ved SDS-PAGE

Tilleggservices (Valgfritt)
Få et Gratis Tilbud

Get in touch