Monoklonale antistoffer produktion i E. coli: fremskridt og udsigter

Monoklonale antistoffer (mAb'er), som er opløselige glycoproteiner på ca. 150 kDa bestående af tunge og lette kæder, anvendes i vid udstrækning i behandlingen af ​​cancere og autoimmune sygdomme. I de senere år er produktionsmetoderne for mAbs og deres derivater blevet forskelligartede, med Escherichia coli (E. coli) fremstår som en vigtig vært til produktion af antistoffragmenter.

Inden for produktion af mAbs udmærker Yaohai Bio-Pharma sig med rig F&U-erfaring. Med en moden platform, avanceret udstyr og innovativ fuld-økologisk udtryksteknologi tilbyder Yaohai one-stop-tjenester fra cellebankkonstruktion til udfyldning og færdiggørelse, fuldt tilpassede mAbs til klienter.

Fremstillingsmetoder for mAbs i E. coli

E. coli tilbyder hurtig vækst, lave omkostninger, nem betjening og fleksibilitet i udtryk i cytoplasmaet, periplasmaet eller dyrkningsmediet. I E. coli er antistofproduktion hovedsageligt kategoriseret i periplasmatisk, cytoplasmatisk og semi-oxideret cytoplasmatisk produktion, såvel som cellefri proteinsyntese (CFPS) systemer. Periplasmatisk produktion har opnået høje udbytter af funktionelt fuldlængde immunoglobulin G (FL-IgG) gennem optimeret ekspression og sekretionsbalance. Cytoplasmatisk produktion står over for udfordringer på grund af det reducerende miljø, men funktionelt FL-IgG er med succes blevet udtrykt af tekniske stammer for at skabe et oxidativt miljø. CFPS-systemet har opnået effektiv antistofproduktion ved at justere translationsinitieringsregioner og tilføje chaperoneproteiner.

Antistofkarakterisering og kvalitetskontrol

Kvalitetskontrol af antistoffer omfatter biokemiske, biofysiske og biologiske karakteriseringer. Biokemisk karakterisering analyserer blandt andet antistofstruktur, sekvens og glykosylering. Biofysisk karakterisering evaluerer homogenitet, opløselighed og stabilitet. Biologisk karakterisering validerer antistofbioaktivitet, herunder ADCC og CDC, blandt andre. Selvom deglycosylerede antistoffer produceret i E. coli mangler visse Fc-effektorfunktioner, har undersøgelser vist, at deres stabilitet svarer til den for glycosylerede antistoffer, og de udviser lignende terapeutisk effektivitet under testede betingelser.

For at genoprette eller forbedre immuneffekterne af deglycosylerede antistoffer kan Fc-domæner manipuleres. For eksempel kan mutanter, der binder til FcɣRI, screenes for at forbedre ADCC-effektorfunktionen. Disse konstruerede antistoffer viser betydelige biologiske virkninger og terapeutisk potentiale både in vitro og in vivo.

Konklusion

Sammenfattende har produktionen af ​​deglycosylerede antistoffer i E. coli gjort vigtige fremskridt inden for antistofproduktion, hvilket reducerer omkostningerne og forbedrer kvaliteten. Selvom de mangler visse Fc-effektorfunktioner, udviser de gennem teknisk design forbedrede effektorfunktioner og terapeutisk potentiale. Det forventes, at flere deglycosylerede antistoffer produceret i E. coli vil indgå i kliniske studier i fremtiden.

Vi søger også aktivt institutionelle eller individuelle globale partnere. Vi tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har spørgsmål, er du velkommen til at kontakte os på [email protected]