Produktion af monoklonale antistoffer i E. coli: fremskridt og udsigter

Monoklonale antistoffer (mAbs), som er opdelbare glykoproteiner på omkring 150 kDa bestående af tunge og lette kæder, bruges vidt omfattende i behandlingen af kræft og autoimmune sygdomme. I de senere år er fremstillingsmetoderne for mAbs og deres derivater blevet mere varierede, med at Escherichia coli ( E. coli ) er kommet til at spille en vigtig rolle som værtsorganisme for fremstillingen af antibodyfragmenter.

Ved fremstillingen af mAbs står Yaohai Bio-Pharma ud fra med rig R&D-erfaring. Med et veludviklet platform, avanceret udstyr og en innovativ fuld-økologisk ekspresstechnologi tilbyder Yaohai alt-i-en-tjeneste fra cellebankkonstruktion til fylde&afslutning, fuldt tilpasset mAbs for kunder.

Fremstillingsmetoder for mAbs i E. coli

E. coli tilbyder hurtigt vækst, lave omkostninger, nem håndtering og fleksibilitet i udtryk inden for cytoplasma, periplasma eller kulturmiljø. Ved E. coli opdeles produktion af antistoffer hovedsagelig i periplasmatiske, cytoplasmatisk og halv-oxiderede cytoplasmatisk produktion samt cellefri proteinproduktion (CFPS) systemer. Periplasmatic produktion har opnået høje udbytter af funktionelle fuldlængdes immunoglobulin G (FL-IgG) gennem optimeret balance mellem udtryk og sekretion. Cytoplasmatisk produktion står overfor udfordringer på grund af den reducerende miljø, men funktionel FL-IgG er blevet udtrykt med succes ved at modificere stammer for at skabe et oxidativt miljø. CFPS-systemet har opnået effektiv produktion af antistoffer ved at justere translationsinitieringsområder og tilføje chaperonprotein.

Antistofkarakterisering og kvalitetskontrol

Kvalitetskontrol af antistoffer omfatter kemisk, biofysisk og biologisk karakterisering. Kemisk karakterisering analyserer antistofstruktur, sekvens og glykosylation blandt andre. Biofysisk karakterisering vurderer homogenitet, oppløselighed og stabilitet. Biologisk karakterisering bekræfter antistofsbioaktivitet, herunder ADCC og CDC blandt andre. Selvom deglykosylerede antistoffer produceret i E. coli mangler visse Fc-effektorfunktioner, har studier vist, at deres stabilitet er lignende den af glykosylerede antistoffer, og de udviser en lignende terapeutisk effekt under testede forhold.

For at genskabe eller forbedre de immunologiske virkninger af deglykosylerede antistoffer kan Fc-domæner konstrueres. For eksempel kan mutantstyper, der binder til FcɣRI, skærmes for at forbedre ADCC-effektorfunktionen. Disse konstruerede antistoffer demonstrerer betydelige biologiske virkninger og terapeutisk potentiale både in vitro og in vivo.

Konklusion

I samlet opsummering har produktionen af deglykosylerede antistoffer i E. coli gjort vigtige fremskridt inden for produktion af antistoffer, hvilket har reduceret omkostningerne og forbedret kvaliteten. Selvom de mangler visse Fc-effektorfunktioner, udviser de gennem ingeniorering designede forbedrede effektorfunktioner og terapeutisk potentiale. Det forventes, at flere deglykosylerede antistoffer produceret i E. coli vil komme ind i kliniske studier i fremtiden.

Vi søger også aktivt institutionelle eller individuelle globale partnere. Vi tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har nogen spørgsmål, tøv ikke med at kontakte os på [email protected]