Udforsk den fascinerende verden af ​​lithiumchloridudfældning

Lithiumchloridudfældning bruges i vid udstrækning til at adskille RNA fra opløsning.

Her er opdelingen af ​​processen:

1. Prøveforberedelse: Start med en prøve indeholdende RNA, som f.eks in vitro transskriptionsblanding.

2. Tilsætning af lithiumchlorid: Tilsæt et passende volumen koncentreret lithiumchloridopløsning til RNA-opløsningen.

3. Inkubation: Efter tilsætning af lithiumchlorid inkuberes opløsningen ved en lav temperatur, generelt omkring -20°C. Dette får RNA-molekyler til at præcipitere ud af opløsningen.

4. Centrifugering: Efter inkubation centrifugeres opløsningen ved høj hastighed. Dette adskiller det udfældede RNA fra resten af ​​opløsningen, som indeholder urenheder.

5. Vask: Når centrifugeringen er afsluttet, fjernes forsigtigt supernatanten, men uden at forstyrre RNA-udfældningen. Vask RNA-partiklerne med kold ethanol eller isopropylalkohol for at fjerne eventuelle resterende urenheder.

6. RNA-resuspension: Efter vask lufttørres RNA-præcipitatet kortvarigt og resuspenderes derefter i en passende buffer, såsom TE-buffer (Tris-EDTA-buffer) eller destilleret vand. Forsigtig pipettering eller hvirvelstrømme kan være nødvendige for at resuspendere RNA'et tilstrækkeligt.

7. Kvantificering og analyse: Til sidst kvantificeres det isolerede RNA ved ultraviolet spektroskopi eller fluorescensmetode. Dette bestemmer koncentrationen og renheden af ​​RNA-prøven, hvilket er vigtigt for downstream-applikationer såsom LNP-indkapsling og celletransfektion.

Yaohai Bio-Pharma er dygtig til at bruge lithiumchloridudfældningsmetoden i produktionsprocessen, fordi den er enkel, billig og producerer RNA af høj kvalitet, der er egnet til en række molekylærbiologiske anvendelser. Det er dog vigtigt at optimere betingelserne (f.eks. lithiumchloridkoncentration, inkubationstid, centrifugeringshastighed) for at opnå de bedste resultater for en bestemt prøve.

Baseret på vores kraftfulde og proprietære RNASci-platform leverer vi også skræddersyede RNA-syntesetjenester samt mRNA (op til 10 kb), circRNA (op til 4 kb) og LNP-katalogprodukter. Vi har etableret et komplet sæt mRNA/circRNA-synteseteknologier for at levere RNA af høj kvalitet, såsom sekvensdesign og optimering, IVT, cirkularisering, oprensning og LNP-indkapsling. Alle produkter frigives under de strenge kvalitetskontrolstandarder.

Yaohai Bio-Pharma er den første og største biologiske CRDMO dedikeret til mikrobielle ekspressionssystemer i Greater China. Vi tilbyder end-to-end one-stop skræddersyede løsninger eller selvstændige tjenester lige fra RNA-syntese, strain engineering og konstruktion, upstream og downstream procesudvikling, til GMP eller ikke-GMP niveau lægemiddel stof fremstilling, og fill & finish services til forskellige modaliteter, såsom mRNA, circRNA, plasmid-RNA, rekombinante proteiner, peptider, enzymer, enkelt domæne antistoffer (sdAbs) og VLP'er. Vi er forpligtet til at imødekomme globale kunders kliniske og kommercielle behov inden for biologiske lægemidler, vacciner og diagnostik til både human og veterinær brug.

Yaohai Bio-Pharma søger også aktivt institutionelle eller individuelle globale partnere og tilbyder den mest konkurrencedygtige kompensation i branchen. Hvis du har spørgsmål, er du velkommen til at kontakte os: [email protected]