I dag er Yaohai så spændende at dele sin in vitro transkriptionsprotokol for langt RNA. Det er en effektiv strategi, som forskere ofte bruger til at producere RNA i laboratoriet. På denne måde kan forskere producere et betydeligt stort antal langt RNA - noget væsentligt for undersøgelsen på forskellige biologiske områder. Her giver vi en trin-for-trin guide til fremstilling af lange RNA'er via in vitro transkription. Vi vil også tale om, hvordan vi kunne gøre processen bedre og forsøge at løse nogle af de problemer, du står over for ved syntese af langt RNA.
Adskillige væsentlige komponenter er nødvendige for in vitro-transkription, især lang RNA. Du bliver nødt til at give et enzym kaldet RNA-polymerase, skrivemateriale i form af nukleotidtrifosfater (NTP'er), en buffer til at hjælpe reaktionen og noget DNA-skabelon. Hvordan du gør det trin for trin, kan du finde en detaljeret guide her:
Adskillige faktorer er meget vigtige for den gode funktion af syntesen af RNA. Mest bemærkelsesværdigt er mængden af magnesiumioner i selve bufferen vigtig. RNA-polymerase kræver en betydelig mængde magnesium for at understøtte korrekt interaktion med DNA-skabelonen og efterfølgende foldning af RNA'et. Et andet vigtigt aspekt at overveje er koncentrationen af DNA-skabelon. Specifikt skal du have nok skabelon-DNA-reaktion for at få gode RNA-udbytter.
Langt RNA vil selvfølgelig komme med sit eget sæt af problemer. At disse problemer kan relateres til nedbrydningen af RNA'et, påvirke hvordan RNA'et folder, og opbygge strukturer, der potentielt forstyrrer syntetiseringen af RNA'et. En måde at løse disse udfordringer på er ved at justere den buffer, du tager. For en mere omfattende struktur af RNA kan forskere tilføje forskellige specielle kemikalier såsom DTT og p-mercaptoethanol for at hjælpe RNA'et med at folde korrekt og forhindre det i at klæbe sammen eller klumpe.
Derudover er ikke alle lange RNA-typer ens, og nogle kan kræve alternative syntesemetoder. Der er særlige funktioner, som forskerne muligvis skal tilføje i RNA'et, såsom tilføjelse af en 5 cap eller Poly-A hale. Hvis dette er nødvendigt (som forklaret senere), bør forskere inkludere andre enzymer såsom Guanylyltransferase og Poly(A)Polymerase. Man skal også vælge et passende RNA-polymeraseenzym, som naturligt sætter dem i stand til at producere mere RNA. Så snart lang RNA skal syntetiseres, bliver vi nødt til at identificere den bedste tilstand.
Lange RNA'er in vitro transkript Der er en række nøgleanvendelser for den lange RNA in vitro transkriptionsprotokol på tværs af adskillige forsknings-, assay- og terapeutiske bestræbelser. Det hjælper videnskabsmænd med at forstå strukturen af RNA, den måde det fungerer på, og hvordan de kan modificere gener med moderne teknologier. Flere andre dage - opdagelsen af forskellige sygdomme og deres terapeutiske midler som meget aktuelle RNA-terapier - lad os tro, hvor nyttig denne indlæsningsteknologi kan være for medicin.
Der er mange fordele ved at bruge denne protokol. En elektroforesebaseret metode er generelt den mest effektive og omkostningseffektive måde at producere store mængder langt RNA på. Bortset fra kvaliteten af RNA, er et godt udbytte også en vigtig faktor for forskere til at hjælpe dem med deres forskning, især hvis de har brug for store mængder RNA til eksperimenter på grund af højt inputmateriale til at begynde med. Derudover er in vitro-transkription for langt RNA typisk mere nøjagtig og reproducerbar end kemisk syntese eller cellulær syntese af RNA.
Yaohai BioPharma er en Top 10 mikrobiel CDMO, der inkorporerer in vitro transkriptionsprotokol for lang RNA såvel som regulatoriske anliggender. Vi har et kvalitetsstyringssystem, som er i overensstemmelse med gældende GMP-standarder samt globale regler. Vores team af regulatoriske eksperter er dygtige i globale regulatoriske rammer for at fremskynde biologiske lanceringer. Vi sikrer sporbare produktionsprocesser kvalitetsprodukter, samt overholdelse af reglerne fra US FDA og EU EMA. Australien TGA og Kina NMPA er også tilfredse. Yaohai BioPharma har med succes bestået revisionen på stedet af EU's Qualified Person (QP) for vores GMP-kvalitetssystem såvel som vores produktionsanlæg. Desuden har vi godkendt de første certificeringsrevisioner af ISO9001 kvalitetsstyringssystem, ISO14001 miljøstyringssystem og ISO45001 arbejdsmiljøledelsessystem.
Yaohai Bio-Pharma, en top 10 producent af biologiske produkter, er specialist i mikrobiel fermentering. Vi har etableret et avanceret anlæg, der er udstyret med moderne faciliteter og stærke RD-produktionskapaciteter. Vi har fem linjer til fremstilling af lægemiddelstof, der er i overensstemmelse med GMP-kravene til mikrobiel fermentering og oprensning, samt to fyldningslinjer, der er automatiserede til patroner, hætteglas samt fyldte sprøjter. De tilgængelige fermenteringsskalaer varierer fra 100L til 500L, 1000L og 2000L. In vitro transkriptionsprotokol for lang RNA til vias er 1 ml til 25 ml, hvorimod de fyldte sprøjter og patronfyldningsspecifikationerne dækker 1-3 ml. Vores produktionsværksted er cGMP-kompatibelt og garanterer konstant forsyning af kliniske prøver såvel som kommercielle varer. Vores anlæg producerer store molekyler, som sendes til kloden.
Yaohai Bio-Pharma har erfaring med fremstilling af biologiske lægemidler, der er skabt af mikroorganismer. Vi tilbyder skræddersyede RD-løsninger samt produktionstjenester, mens vi minimerer potentielle risici. Vi har arbejdet med forskellige teknikker, såsom rekombinante cellulære underenheder, vacciner (herunder peptider), vækstfaktorer, hormoner og in vitro transkriptprotokollen for lang RNA. Vi er specialister i mange mikroorganismer såsom gær ekstracellulær og intracellulær sekretion (udbytter op til 15g/L) og bakterier intracellulært opløselige, og inklusionslegeme (udbytter op til 10g/L). Vi har også udviklet en BSL-2 fermenteringsplatform til at skabe bakterielle vacciner. Vi har en track record i at forbedre produktionsprocesser og derved øge udbyttet og reducere omkostningerne. Vi har et højeffektivt teknologiteam til at sikre rettidig levering af projekter af høj kvalitet. Dette hjælper os med at bringe dine unikke produkter hurtigere til markedet.
Yaohai Bio-Pharma er en førende in vitro transkriptionsprotokol for lang RNA CDMO. Vores hovedfokus har været produktion af mikrobielle vaccinationer og terapeutiske midler til behandling af kæledyr, menneskers og veterinær sundhed. Vi besidder banebrydende RD- og produktionsteknologiplatforme, der dækker hele fremstillingsprocessen fra konstruktion af mikrobielle stammer, til cellebankbehandling og metodedesign til klinisk og kommerciel fremstilling, hvilket sikrer, at vi kan sikre den succesfulde levering af de mest avancerede løsninger. Vi har akkumuleret en enorm mængde viden inden for biobearbejdning af mikrobielle områder. Mere end 200 projekter er blevet gennemført med succes, og vi hjælper vores kunder med at overholde regler som f.eks. US FDA og EU EMA. Vi hjælper dem også med at navigere i Australien TGA og Kina NMPA. Vi er i stand til at reagere hurtigt på markedets krav og tilbyder skræddersyede CDMO-tjenester på grund af vores erfaring og ekspertise.