Згодна з цэнтральнай догмай, інфармацыйная РНК (мРНК) з'яўляецца мостам для перадачы генетычнага матэрыялу ад ДНК да бялкоў.
мРНК адыгрывае біялагічную ролю, кадуючы бялкі in vivo, і спелая мРНК у эукарыётычных арганізмах складаецца з пяці кампанентаў: 5' Cap (структура крышкі), 5' UTR (некадуючая вобласць), ORF (адкрытая рамка счытвання), 3' UTR , і 3' хвост polyA (хвост поліадэнілату).
Падрабязнасці паслуг
| Працэс |
Дадатковая паслуга |
Падрабязнасці аб паслузе |
Тэрмін дастаўкі (дзень) |
| Дызайн і аптымізацыя паслядоўнасці мРНК |
Дызайн і аптымізацыя паслядоўнасцей кадавання |
Выраўноўванне паслядоўнасці CDS
Аптымізацыя кодона CDS
|
1 |
| Дызайн і аптымізацыя некадуючых паслядоўнасцей |
Дызайн і аптымізацыя паслядоўнасці 5' UTR
Дызайн і аптымізацыя паслядоўнасці 3' UTR
праектаванне і аптымізацыя паслядоўнасці polyA
|
1-2 |
Наладжвальныя параметры
| 5' UTR/3' UTR |
- Паслядоўнасць UTR прыроды
- Паслядоўнасць UTR мутанта/спраектаванай
|
| 3' PolyA хвост |
- 100A ~120A Хвост (рэкамендуецца)
- Сегментаваны поліА хвост
- Іншы заказны хвост
|
Агульныя стратэгіі распрацоўкі паслядоўнасці мРНК
| Кампаненты мРНК |
Біялагічныя функцыі |
Стратэгіі аптымізацыі |
| 5' Кап |
Абараніце мРНК ад дэградацыі экзануклеазамі і дзейнічайце сумесна з хвастом polyA на 3'-канцы, бялком, які звязвае polyA, і бялком фактару ініцыяцыі трансляцыі, каб ініцыяваць трансляцыю бялку. |
Натуральная структура Cap1 пазбягае рэцэптараў распазнання вобразаў і, такім чынам, зніжае натуральны імунны адказ, што можа быць дасягнута аднаэтапным або двухэтапным ферментатыўным каўпачэннем [падрабязнасці гл. |
| 5' УТР |
5' UTR можа распазнавацца рыбасомамі, рэгуляваць трансляцыю мРНК і ўплываць на стабільнасць мРНК. |
Утрымліваюць паслядоўнасці Козака без вельмі стабільнай другаснай структуры. Натуральныя UTR генаў з высокай экспрэсіяй з'яўляюцца пераважнымі для мРНК транскрыпцыі in vitro (IVT), такіх як α-глабін і β-глабін. |
| CDS |
Вобласці, якія кадуюць бялок, і паслядоўнасці, якія кадуюць антыгены, антыцелы або іншыя функцыянальныя бялкі. |
Аптымізацыя кадонаў павышае ўзровень трансляцыі, адзначаючы, што некаторыя неаптымальныя кадоны могуць гуляць пэўную ролю ў згортванні бялку. |
| 3' УТР |
Рэгулююць трансляцыю і стабільнасць мРНК. |
Натуральныя UTR генаў з высокай экспрэсіяй з'яўляюцца пераважнымі для мРНК IVT, такіх як α-глабін і β-глабін. |
| 3' поліА хвост |
Рэгулююць экспрэсію бялку і абараняюць структуру крышкі ад дэградацыі. |
Неабходная адпаведная даўжыня (100-150 пн); кадзіраванне хваста polyA на плазмідзе шаблону транскрыпцыі забяспечвае больш пэўную даўжыню хваста polyA. |
нашы Асаблівасці
- Дыверсіфікаваны выбар крыніц UTR
Некалькі крыніц высока выяўленых натуральных і мадыфікаваных бібліятэк UTR; спелая стратэгія мадыфікацыі UTR;
- Перадавая каманда па аптымізацыі CDS
Супрацоўнічайце з прафесійнай групай алгарытмаў штучнага інтэлекту, каб завяршыць аптымізацыю кодонаў.
- Раўнамернае размеркаванне хваста polyA
Дадайце паслядоўнасці поліА ў адпаведнасці з шаблонамі ДНК, каб больш дакладна кантраляваць даўжыню мРНК.
- Разнастайныя камбінацыі аптымізацыі
Дасягнуць эфектыўнай экспрэсіі мРНК з нізкай імунагеннасць.
Кейс
Дызайн паслядоўнасці мРНК з падвойным рэпарцёрам: мРНК mCherry-eGFP
Сэрвіс мРНК кампаніі Yaohai Bio-Pharma працягвае мадэрнізавацца за кошт распрацоўкі і аптымізацыі тандэмнай паслядоўнасці двайнога рэпарцёрнага гена, якая дасягае сумеснай экспрэсіі двайных генаў.
Выкарыстоўваючы звычайны рэагент для трансфекцыі, тандэмная паслядоўнасць двайнога гена mCherry-eGFP мРНК трансфікуецца ў клеткі 293T, і два флуарэсцэнтныя сігналы mCherry (чырвоны) і ўзмоцнены зялёны флуарэсцэнтны бялок (eGFP) выяўляюцца з адначасовай экспрэсіяй праз 48 гадзін, і стэк графік вылучаны жоўтым колерам.
Экспрэсія мРНК mCherry-eGFP у клетцы 293T
BE
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
MK
UR
BN
