Асновай інкапсуляцыі з'яўляецца праектаванне і распрацоўка сістэмы дастаўкі. Добра распрацаваная сістэма дастаўкі дазваляе малекулам circRNA пранікаць у арганізм без дэградацыі ферментамі РНК, а затым эфектыўна дастаўляцца да месца-мішэні, перасякаць клеткавую мембрану і вызваляцца ўнутры клеткі.
Ліпідныя наначасціцы (LNP) - лепшая даступная сістэма дастаўкі з перавагамі ў інкапсуляцыі, экспрэсіі in vivo і бяспецы in vivo ў параўнанні з іншымі сістэмамі дастаўкі. ЛНП з фрагментамі нуклеінавых кіслот лёгка праглынаюцца клеткамі і ўтвараюць ўнутрыклеткавых цела. Патрапіўшы ў клетку, кіслае асяроддзе ўнутрыклеткавага цела пратаніруе і станоўча зараджае галоўку іянізаванага ліпіда, зліваючы такім чынам з унутранай мембранай ўнутрыклеткавага цела і вызваляючы мэтавую нуклеінавую кіслату ў клетку для дзеяння.
Паслуга circRNA Yaohai Bio-Pharma працягвае ўдасканальвацца і можа прадастаўляць паслугі інкапсуляцыі circRNA-LNP для аптымізацыі адпаведных крытычных параметраў працэсу і паляпшэння ўзгодненасці і ўзнаўляльнасці вытворчасці лекавых сродкаў circRNA.
Працэс | Падрабязнасці аб паслузе | Тэрмін дастаўкі (дзень) | Чаканыя вынікі |
інкапсуляцыя circRNA-LNP | Папярэдняя апрацоўка матэрыялу і вадкасці | 2 | лекавы прадукт circRNA-LNP (DP) |
Мікрафлюідная прылада змешвання | |||
Тангенцыяльная фільтрацыя патоку | 1 | ||
Стэрылізуе фільтраванне | |||
кантроль якасці circRNA-LNP | Эфектыўнасць інкапсуляцыі | 1 | пратакол выпрабаванняў |
Памер часціц і індэкс полидисперсности | |||
Дзета патэнцыял |
Хуткі сінтэз, высокая эфектыўнасць даследаванняў і распрацовак і папярэдне аптымізаваныя рашэнні;
Каэфіцыент інкапсуляцыі можа дасягаць больш за 90%;
Памер наначасціц ліпідаў можна кантраляваць, змяняючы хуткасць і суадносіны ўпырску вадкасці;
Прадукты circRNA-LNP пацверджаны клеткавай экспрэсіяй in vitro і могуць эфектыўна экспрэсаваць мэтавы бялок.
Рыхтуюцца ўзоры circRNA LNP-eGFP і іх розныя дозы (1 мкг, 2 мкг і 4 мкг) непасрэдна трансфецыруюцца ў клеткі 293T, каб праверыць, ці могуць яны экспрэсаваць бялок-мішэнь. Праз 48 гадзін трансфекцыі можна назіраць выразны флуарэсцэнтны сігнал і эфект эскалацыі дозы інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі.
Lipo-circ_eGFP, які складаецца з липосомы і неинкапсулированной eGFP circRNA, бярэцца ў якасці кантролю.