Значэнне аналізу патэнцыі мРНК
З хуткім развіццём мРНК-вакцын і тэрапеўтычных прэпаратаў патрабуецца спецыяльная панэль метадаў аналізу для праверкі патэнцыі (вызначэння іх біялагічнай актыўнасці), уключаючы эфектыўнасць трансляцыі мРНК. Гэтыя метады звычайна заснаваныя на трансфекцыі клетак і функцыянальных аналізах бялку-мішэні.
Yaohai Bio-Pharma прапануе клеткавыя аналізы патэнцыі для мРНК лекавых рэчываў або прадуктаў LNP, уключаючы трансфекцыю клетак (клеткі 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 і інш.) і аналізы ELISA або Вестэрн-блот (ВБ).
Нарматыўныя патрабаванні да аналізаў патэнцыі
У адпаведнасці з нарматыўнымі меркаваннямі СААЗ, «Эфектыўнасць кожнай партыі канчатковай вакцыны павінна вызначацца з выкарыстаннем адпаведных колькасных і правераных функцыянальных метадаў. Патэнцыйныя аналізы патэнцыі in vitro могуць уключаць у сябе клеткавыя сістэмы трансфекцыі або бесклетачныя аналізы». А USP рэкамендаваў «аналіз на аснове клетак» для праверкі эфектыўнасці мРНК, г.зн. экспрэсіі бялку-мішэні.
Працэдура
Крок 1. Клеткавая трансфекцыя мРНК або мРНК-LNP
Клеткі культывуюць і трансфікуюць мРНК або мРНК-LNP. У дэталях, мРНК трансфікуецца пасля змешвання з рэагентам для трансфекцыі, у той час як мРНК-LNP трансфікуецца непасрэдна ў клеткі. Праз 24-48 гадзін асвятліце супернатант, які змяшчае экспрэсаваны бялок, цэнтрыфугаваннем.
Крок 2. Функцыянальныя аналізы мэтавага бялку
Выканайце аналізы ELISA або WB для ацэнкі функцыянальнага звязвання бялкоў-мішэняў.
Case Study
Клеткавыя аналізы патэнцыі узораў мРНК
Кампанія Yaohai-BioPharma распрацавала клеткавы метад аналізу патэнцыі для мРНК, які ўключае культуру клетак, трансфекцыю клетак і функцыянальныя аналізы бялку. Мы трансфікавалі мРНК eGFP, мРНК mCherry, мРНК люцыферазы, мРНК спайк-пратэіна ў клеткі 293T і выявілі бялок-мішэнь з дапамогай флуарэсцэнцыі, люмінесцэнтнага або каляровага сігналу, WB, ELISA.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
