Даручальная сінтэзіса saRNA
Самапалючаяся mRNA (saRNA), таксама вядомая як реплікан RNA, кодуе секвенцыі in vitro транскрыпцыі (IVT) mRNA і гены віруснай репліказы, якія атрымліваюцца ад алфавірусаў ці флавірусаў. Гены віруснай репліказы дазваляюць самапаленне mRNA, што прыводзіць да збяльшэння экспрэсіі белка і мінімальнага патрабванага дозы RNA ў спалошэнні з непаленымі mRNA. Іншым аспектам з'яўляецца тое, што saRNA - гэта досыць вялікі молекула (больш чым 14 кб).
Yaohai Bio-Pharma стварыла набор тэхналогій сінтэза mRNA, каб прынімаць непалены mRNA і самапалючуюся mRNA (1000 nt~14000 nt), такія як дызайн і аптымізацыя секвенцыі, IVT, чыстка, ліофілізацыя і енкапсуляцыя ліпіднымі наначастицамі (LNP). Усе produkty выдаюцца па строгіх стандартых каляesco.
Рыс.1 Структурныя асаблівасці IVT мРНК: традыцыянная, кольцавая і самапалічальная мРНК.
Паслядоўнасць асаблівасцяў самапалічальнай мРНК
Самапалічальная РНК складаецца з чатырох няструктурыных белкаў (якія называюцца nsP1, nsP2, nsP3 і nsP4), якія пачынаюцца ад алфавірусав, венесуэльскага кашчэевага энцефаліту (VEEV). Сродзімім чынам nsP1 выказвае двойную анзыматычную актыўнасць, а сама GTase і N7MTase, у той час як nsP2 мае RTPase-актыўнасць, што ўжыткова для завяшчэння IVT мРНК, каб стварыць структуру Cap 0. Кропка прыма, nsP2 служыць як пратэаза і хеліказа, дапамагаючы складанай пераробцы цалога комплекса nsP. Точная функцыя nsP3 залишаецца неадкрытай, але яна ўдзельнічае ў інтэрэйкунках з рознымі белкамі хост-клеткі, што спрыяе змяшчэнню антывірусавага адказу, запусценнага хостам.
Рэгіён падгенамнага праматара (SGP) алфавірус знаходзіцца перад гена ацэнтраванасці (GOI). Элемент SGP дапамагае пачатку транскрыпцыі GOI, абходзячы чытанне паследавання, якое кодуе вірусныя белкі nsP.
Рыс.2 Сінтэз і клеточныя тэсты eGFP saRNA платфармы Yaohai Bio-Pharma RNASci.
Застаўныя рашэнні saRNA
Пратокол сінтэза saRNA сапраўдна схожы на mRNA: Замовіць синтэз mRNA
- Дызайн паслядоўнасці
- Падготовка плазміднага шаблона
- транскрыпцыя вонкаштоўна (IVT)
- энзыматычнае закрыццё mRNA
- ко-транскрыпцыйнае закрыццё mRNA
- чыстка mRNA
- ліофілізацыя mRNA
- Энкапсуляцыя LNP
- Аналіз і тэсты
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
