ПРОЦЕС |
Апцыянальная служба |
Дэталі сервісу |
Тэрмін выканання (робальны дзень) |
Выданне |
праектаванне і аптымізацыя паследавательнасці mRNA |
Праектаванне і аптымізацыя кодуючых паследавательнасцей |
Дызайн паследавання CDS і аптымізацыя кодонаў |
1-3 |
Файл паследавання |
Праектаванне і аптымізацыя не кодуючых паследавательнасцей |
Дызайн і аптымізацыя паследаванняў UTR, polyA |
Падготовка плазміднага шаблона транскрыпцыі |
Падготовка рекамбінацыйных плазмід |
Сінтэз гена |
7-10 |
Ампліфікацыя і вылічэнне плазмід |
4 |
Лінейрызацыя і чысценне плазмід |
ін вітро транскрыпцыя mRNA |
Капінг падчас транскрыпцыі (адна-этапны метад) |
Транскрыпцыя вітру (IVT) / Аналаг капа |
1-2 |
Н/А |
Модыфікацыі нуклеатадаў (модыфікацыі UTP/CTP) |
Выдаленне ДНК-шаблона (ДНаза I) |
Энзыматычны капінг (два-этапны працэс) |
IVT |
2-3 |
Модыфікацыі нуклеатадаў (модыфікацыі UTP/CTP) |
Выдаленне ДНК-шаблона (ДНаза I) |
чыстка mRNA (хлорак літава / намагнітае часткі) |
Энзыматычны капінг |
чыстка mRNA |
Прадстаўны схема чысткі |
Адкладванне хлоракам літава |
1 |
падлога лекарства mRNA |
Чысціць магнітнымі бусінкамі |
Схема чысцэння ў ступцы хроматографіі |
Камбінацыя колькіх метадаў хроматографіі |
1-2 |
Змена буфара |
Ультрафільтрацыя |
1 |
ліофілізацыя mRNA |
Ліофілізацыя |
Папярэдняя заморозка |
2-3 |
ліофілізаваны порошок mRNA |
Першае сушэнне (сублімацыя) |
Другая сушка (дезабсорцыя) |
мRNAЭнкапсуляцыя |
Энкапсуляцыя LNP |
Энкапсуляцыя LNP |
2-3 |
мRNA-LNPЛекарственная продукция |
Канцэнтрацыя і замена буфера |
аналіз якасці mRNA |
мRNA лекарственная субстанция/ліофілізаваны пыль |
Канцэнтрацыя, чыстата |
1 |
Прапозіцыя навуковых даследванняў |
Цэлыść, эфектыўнасць закрывання, распрадзел хвоста polyA |
2-5 |
мRNA-LNP лекарственная продукция |
Эфектыўнасць энкапсуляцыі |
1 |
Размер чырынак і распрадзел |
Паверхневыя заряд |
пацверджэнне экспрэсіі mRNA |
ацэнка клетак 293T |
Клетачнае пластуваўванне |
4 |
Часовая трансфекцыя клетак |
Набліўванне флуарэсцэнтнага сігналу |
1-3 |
Western blot (WB) / Аналітыйным методам ELISA |