Значэнне асайы на падзелавую цэннасць mRNA
З рэператыўным развіццем вакцын і лікаў на базе mRNA неабходна спецыфічны набор метадаў аналізу для тэsts падзелавай цэннасці (вызначэння яе біягалагічнай актыўнасці), уключая эфектывнасць перакладання mRNA. Гэтыя метады звычайна сутыкляюцца з трансфекцыяй клетак і функцыянальнымі асайямі таргэтнага белка.
Yaohai Bio-Pharma прапаноўвае асайы на падзелавую цэннасць на базе клетак для субстанцый лікаў mRNA ці продуктаў LNP, уключая трансфекцыю клетак (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 клеткі і інш.) і асайы ELISA ці Western Blotting (WB).
Рэгламентныя вымярэнні для асай на цэннасць
Згідна з рэгulaтарнымi размiшэннямi WHO, «Патэнцыя кожнай парты кансуматыўнага вакцыну павінна вызначацца з выкарыстаннем дастаткова колькаснага і ўдакладненага функцыянальнага метада(у). Можлівыя in vitro асаббіткі патэнцыі магут уключаць сістэмы трансфекцыі на базе клетак ці бесклетковыя асаббітки». I USP прапанула «асаббітку на базе клетак» для тэsts патэнцыі mRNA, г.зн., выразу цэлевага белка.
Процэдура
Этап 1. Трансфекцыя на базе клетак mRNA ці mRNA-LNP
Клеткі культивуюцца і трансфікуюцца mRNA ці mRNA-LNP. Дзялодзейна, mRNA трансфікуюцца пасля яе сумешвання з рэagensам трансфекцыі, пакуль mRNA-LNP перадаецца напрамую ў клеткі. Пасля 24-48 гадзін адчыніце супернатант, які ўтрымлівае выразлены белок, шляхам цэнтрыйкания.
Этап 2. Функцыянальныя асаббітки цэлевага белка
Выkonайце ELISA ці WB тэсты для ацэнкі функцыянальнага спалучэння цэлевых белкаў.
Прыклад даследвання
Клітачныя тэсты эфектыўнасці пробы mRNA
Yaohai-BioPharma розвіла клітачную метадыку тэсту эфектыўнасці mRNA, якая ўключае клітачнае выхаванне, трансфекцыю клітак і функцыянальныя тэсты белкаў. Мы трансфікавалі eGFP mRNA, mCherry mRNA, люціферазную mRNA, mRNA белка спайка ў кліткі 293T і выяўлялі цэлевы белок праз флуорэсцэнтны, люмінесцэнтны ці забаронены сігнал, WB, ELISA.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
