يتطلب إعداد CircRNA RNA خطيًا كمادة أولية (سلائف RNA) للدورة، حيث يتم عادةً تحضير سلائف RNA باستخدام DNA البلازميد الخطي كقالب نسخ ويتم نسخه في المختبر بمساعدة بوليميريز T7 RNA.
يعد DNA البلازميد عالي الجودة ضروريًا للنسخ المختبري (IVT). استنادًا إلى منصة خدمة تحضير البلازميد الناضجة، يمكن لشركة Yaohai Bio-Pharma توفير خدمة تحضير DNA البلازميد الخطي (pDNA) عالية النقاء والمعيارية لضمان سلامة منتجات IVT.
طريقة عملنا | خدمة اختيارية | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم عمل) |
إعداد البلازميد الدائري | التوليف الجيني | التوليف الجيني (طرف ثالث) | 7-10 |
تضخيم البلازميد | تضخيم البلازميد | 2 | |
استخراج البلازميد | |||
إعداد البلازميد الخطي | الخطية البلازميد وتنقيتها | الخطية البلازميد | 1 |
تنقية الحمض النووي الخطي | |||
مراقبة جودة الحمض النووي البلازميدي | نقاء التركيز | قياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية | 1-2 |
التشكل البلازميد | الاغاروز هلام الكهربائي (AGE) | ||
الرحلان الكهربائي الشعري (CE) - اختياري | |||
تحديد البلازميد | تحديد إنزيم التقييد / AGE |
اختيار مرن لطرق الخطية
تحسين طرق استخراج وتنقية الحمض النووي لتحقيق معدلات استرداد عالية.
معايير صارمة للتحكم في العمليات، مع معدل تشكل حلزوني فائق لعينات البلازميد للبحث يزيد عن 80%.
خدمات إعداد البلازميد ومراقبة الجودة عالية المستوى وعالية الكفاءة لتلبية الاحتياجات التجريبية.
إذا أخذنا منتج mCherry circRNA الخاص بشركة Yaohai Bio-Pharma كمثال، فإن نسبة الملف الفائق لعينات بلازميد قالب النسخ (درجة البحث) تزيد عن 70%، مع معدل خطي يقترب من 100%.
يتم إعداد mCherry circRNA باستخدام البلازميد الخطي كقالب ويتم نقله إلى خلايا 293T. تم اكتشاف مستوى عالٍ من التعبير الفلوري (التألق الأحمر) بعد 24 ساعة من ترنسفكأيشن، والذي سيتم تعزيزه بعد 48 ساعة، ولا يزال من الممكن اكتشافه في اليوم السابع واليوم الرابع عشر بعد ترنسفكأيشن.
يتم التعبير عن بروتين mCherry بشكل ثابت وفعال، ويمكن أن تلبي نقاء القالب النسخي متطلبات منتج الدواء circRNA (DP) بجودة عالية.
في التحقق من صحة التعبير في المختبر من mCherry circRNA