وفقا للعقيدة المركزية، فإن الحمض النووي الريبوزي المرسال (mRNA) هو جسر لنقل المواد الوراثية من الحمض النووي إلى البروتينات.
يلعب mRNA دورًا بيولوجيًا عن طريق تشفير البروتينات في الجسم الحي، ويتكون mRNA الناضج في الكائنات حقيقية النواة من خمسة مكونات: 5' Cap (بنية الغطاء)، 5' UTR (منطقة غير مشفرة)، ORF (إطار القراءة المفتوح)، 3ʹ UTR و 3 'ذيل polyA (ذيل متعدد الأدينيلات).
طريقة عملنا | خدمة اختيارية | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم) |
تصميم تسلسل mRNA وتحسينه | تصميم وتحسين تسلسلات الترميز | محاذاة تسلسل CDS تحسين كود CDS | 1 |
تصميم وتحسين التسلسلات غير المشفرة | 5 'تصميم تسلسل UTR وتحسينه 3 'تصميم تسلسل UTR وتحسينه تصميم تسلسل polyA وتحسينه | 1-2 |
5' UTR/3' UTR |
|
3' ذيل بوليا |
|
مكونات مرنا | الوظائف البيولوجية | استراتيجيات التحسين |
5 'كاب | حماية mRNA من التحلل بواسطة نوكلياز خارجية والعمل بالتنسيق مع ذيل polyA في النهاية 3'، وبروتين ربط polyA وبروتين عامل بدء الترجمة لبدء ترجمة البروتين. | يتجنب هيكل Cap1 الطبيعي مستقبلات التعرف على الأنماط وبالتالي يقلل من الاستجابة المناعية الطبيعية، والتي يمكن تحقيقها عن طريق السد النسخي المشترك بخطوة واحدة أو السد الأنزيمي المكون من خطوتين [انظر السد الأنزيمي mRNA والسد النسخي المشترك لمزيد من التفاصيل]. |
5 'UTR | يمكن التعرف على 5' UTR بواسطة الريبوسومات، وتنظيم ترجمة mRNA والتأثير على استقرار mRNA. | تحتوي على تسلسلات كوزاك بدون بنية ثانوية مستقرة جدًا. تُفضل UTRs الطبيعية للجينات المعبر عنها بشكل كبير في النسخ المختبرية (IVT) mRNAs مثل α-globin و β-globin. |
CDS | مناطق ترميز البروتين وتسلسلات الترميز للمستضدات أو الأجسام المضادة أو البروتينات الوظيفية الأخرى. | يؤدي تحسين الكودون إلى زيادة مستوى الترجمة، مع ملاحظة أن بعض الكودونات غير المثالية قد تلعب دورًا في طي البروتين. |
3 'UTR | تنظيم ترجمة mRNA واستقراره. | يُفضل استخدام UTRs الطبيعية للجينات المعبر عنها بشكل كبير في IVT mRNAs مثل α-globin وβ-globin. |
ذيل بولي 3 بوصات | تنظيم التعبير البروتيني وحماية بنية الغطاء من التحلل. | الطول المناسب (100-150 bp) مطلوب؛ يضمن تشفير ذيل polyA على بلازميد قالب النسخ طول ذيل polyA أكثر تحديدًا. |
مصادر متعددة لمكتبات UTR الطبيعية والمعدلة للغاية؛ استراتيجية تعديل UTR الناضجة؛
تعاون مع فريق خوارزميات الذكاء الاصطناعي المحترف لإكمال تحسين الكودونات.
إضافة تسلسلات polyA وفقًا لقوالب الحمض النووي للتحكم في طول mRNA بشكل أكثر دقة.
تحقيق التعبير الفعال عن mRNA مع انخفاض المناعة.
تصميم تسلسل مرنا ثنائي المراسل: mCherry-eGFP مرنا
تستمر خدمة mRNA الخاصة بشركة Yaohai Bio-Pharma في الترقية من خلال تصميم وتحسين التسلسل الترادفي الجيني للمراسل المزدوج، والذي يحقق التعبير المشترك عن الجينات المزدوجة.
باستخدام كاشف ترنسفكأيشن تقليدي، يتم نقل تسلسل الجينات المزدوجة mCherry-eGFP mRNA إلى 293T من الخلايا، ويتم الكشف عن إشارتين فلورسنت من mCherry (أحمر) وبروتين فلوري أخضر معزز (eGFP) بتعبير متزامن بعد 48 ساعة، ويتم الكشف عن الإشارات الفلورية المكدسة. يتم تمييز الرسم البياني باللون الأصفر.
التعبير عن mCherry-eGFP مرنا في خلية 293T