فيما يتعلق بإعداد دفعة من سلائف الحمض النووي الريبي (RNA)، فإن الطريقة الشائعة الاستخدام هي النسخ في المختبر (IVT). يستخدم تفاعل IVT DNA البلازميد الخطي الذي يحتوي على مروج T7 كقالب ويصنع سلائف RNA مع نيوكليوسيد ثلاثي الفوسفات (NTPs) كركيزة في وجود بوليميريز T7 RNA.
تتضمن طرق التدوير في المختبر الربط الكيميائي، والربط الأنزيمي، وطريقة الإنترون-إكسون (PIE). يعتبر الربط الكيميائي والربط الأنزيمي مناسبين لدورة الرناوات الأقصر. عندما يكون الجزء أكبر من 100 nt، فإن معدل التدوير سينخفض بشكل كبير. في المقابل، يمكن لطريقة نوكلياز المستندة إلى نظام PIE أن تحقق تسلسلًا يبلغ 8 كيلو بايت.
تحت تحفيز غوانوزين ثلاثي الفوسفات (GTP)، يخضع هيكل PIE لدورة تسلسلات الإنترون الإضافية. بالاشتراك مع استراتيجية معقولة لزيادة معدل التدوير، يمكن لـ Yaohai Bio-Pharma تحقيق تسلسل يصل إلى 4 كيلو بايت، مع كفاءة تدوير تزيد عن 80%.
يتدفق تفاعل التدوير في المختبر للحمض النووي الريبي (RNA) على النحو التالي:
يتم تصنيع سلائف الحمض النووي الريبي (RNA) عن طريق النسخ في المختبر، ويكمل مكون PIE الربط الذاتي تحت تحفيز GTP لتكوين circRNA.
تفاصيل الخدمات
| طريقة عملنا | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم عمل) |
| في النسخ المختبر والدورة الدموية | تأكيد نظام التفاعل | 1-2 |
| في النسخ المختبر وردود الفعل cyclization |
| RNase R الهضم |
| تحسين رد الفعل | تكوين رد الفعل، وتحسين الوقت | 2-5 |
لماذا تختار هاكروو ؟
- تصميم اختبار صارم والتحسين
يمكن تحقيق ما يصل إلى 4 كيلو بايت من cyclization RNA.
يمكن تحقيق معدل تدوير يزيد عن 80% من خلال استراتيجية تحسين التسلسل العقلاني.
من خلال التحكم الصارم في RNases في البيئة التجريبية والمواد الاستهلاكية، يتم منع تدهور الحمض النووي الريبي (RNA) بشكل فعال.
دراسة حالة
في التدوير في المختبر وإثراء circRNA
استنادًا إلى نظام PIE، قامت شركة Yaohai Bio-Pharma بتحسين تسلسل الحمض النووي الريبوزي الحلقي (CirRNA)، بمعدل دوران يزيد عن 80% عن طريق الفصل الكهربائي لهلام الاغاروز (AGE). باستخدام RNase R لإثراء circRNA، تظهر نتائج الفصل الكهربائي للهلام الإلكتروني أن سلائف RNA الخطية يتم هضمها، وبعد مزيد من التنقية، يمكن إزالة معظم circRNA الملقط. تم تطوير محلول التنقية بواسطة شركة Yaohai Bio-Pharma ذاتيًا.
في التداول المختبري وإثراء circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
